应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 1900bp的一个属的细菌的片段用哪个什么方法可以直接测通
52/1返回列表
查看: 2225  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)

[求助] 1900bp的一个属的细菌的片段用哪个什么方法可以直接测通

我用PCR扩增了一个属的保守片段，其中每个种的碱基会有不同，大约1900bp，用什么测序方法可以直接测我的PCR产物中1900bp的不同序列，从而鉴定其中的种，而不需要做基因文库~
回复此楼

» 猜你喜欢
人生如戏~戏如人生
1楼 2011-05-25 16:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by poog502 at 2011-05-26 11:50:30:
既然是特异引物扩增的，怎么说是混合的？是不是你把不同的种的样品混合，然后扩增得到的特异条带。等等，扩增出现了几条带？可以分开回收条带，分别交给公司直接测序。

我提取原样品的总细菌DNA，扩增了一个属的特异性片段，不同种间片段大小相同，碱基不同，电泳条带不能分开的啊~
赞一下 回复此楼
人生如戏~戏如人生
11楼2011-05-26 14:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dingjunrong(金币+5): 2011-05-25 22:12:35
西瓜(金币+4, EPI+1): Good 2011-05-26 12:45:51
引用回帖:
Originally posted by dingjunrong at 2011-05-25 16:12:22:
我用PCR扩增了一个属的保守片段，其中每个种的碱基会有不同，大约1900bp，用什么测序方法可以直接测我的PCR产物中1900bp的不同序列，从而鉴定其中的种，而不需要做基因文库~

测序保真度800bp左右，
1900bp分成3段600bp~800bp，6对引物pcr 3段产物，测完拼接

2段pcr，1000bp左右，双向测通也行，也要拼接一下

这个没啥难度，跟测序公司说就行，他们有这个服务的，收费也不高，就个引物的钱
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-25 20:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-25 20:18:21:
测序保真度800bp左右，
1900bp分成3段600bp~800bp，6对引物pcr 3段产物，测完拼接

2段pcr，1000bp左右，双向测通也行，也要拼接一下

这个没啥难度，跟测序公司说就行，他们有这个服务的，收费也不高，就 ...

我这个是一个属的混合片段，可以直接测吗？虽然扩出来产物都是1900bp，但是这个PCR产物是不同种的混合片段，不是一种片段，要怎么测，用你说的方法可以吗？
赞一下 回复此楼
人生如戏~戏如人生
3楼2011-05-25 22:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)
你这个混合片段是怎么得到的？有特异引物吗？有引物的话就可以让测序公司测通即可。但你的混合属的片段是怎么搞的，测出来不知道是哪个物种的。
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-25 22:45:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭