应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 1900bp的一个属的细菌的片段用哪个什么方法可以直接测通
121/2返回列表12下一页
查看: 2134  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

dingjunrong

木虫 (小有名气)

[求助] 1900bp的一个属的细菌的片段用哪个什么方法可以直接测通

我用PCR扩增了一个属的保守片段，其中每个种的碱基会有不同，大约1900bp，用什么测序方法可以直接测我的PCR产物中1900bp的不同序列，从而鉴定其中的种，而不需要做基因文库~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
人生如戏~戏如人生
1楼 2011-05-25 16:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dingjunrong(金币+5): 2011-05-25 22:12:35
西瓜(金币+4, EPI+1): Good 2011-05-26 12:45:51
引用回帖:
Originally posted by dingjunrong at 2011-05-25 16:12:22:
我用PCR扩增了一个属的保守片段，其中每个种的碱基会有不同，大约1900bp，用什么测序方法可以直接测我的PCR产物中1900bp的不同序列，从而鉴定其中的种，而不需要做基因文库~

测序保真度800bp左右，
1900bp分成3段600bp~800bp，6对引物pcr 3段产物，测完拼接

2段pcr，1000bp左右，双向测通也行，也要拼接一下

这个没啥难度，跟测序公司说就行，他们有这个服务的，收费也不高，就个引物的钱
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-25 20:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-25 20:18:21:
测序保真度800bp左右，
1900bp分成3段600bp~800bp，6对引物pcr 3段产物，测完拼接

2段pcr，1000bp左右，双向测通也行，也要拼接一下

这个没啥难度，跟测序公司说就行，他们有这个服务的，收费也不高，就 ...

我这个是一个属的混合片段，可以直接测吗？虽然扩出来产物都是1900bp，但是这个PCR产物是不同种的混合片段，不是一种片段，要怎么测，用你说的方法可以吗？
赞一下 回复此楼
人生如戏~戏如人生
3楼2011-05-25 22:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)
你这个混合片段是怎么得到的？有特异引物吗？有引物的话就可以让测序公司测通即可。但你的混合属的片段是怎么搞的，测出来不知道是哪个物种的。
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-25 22:45:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dingjunrong(金币+3): 2011-05-26 09:27:11
西瓜(金币+3): 我外行，不过感觉是个好主意。但代价会不会太大啊？ 2011-05-26 12:47:08
连载体测，可以得到比较好的结果
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-05-26 08:11:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
学习中。
回复此楼
梦在路就在！
6楼2011-05-26 08:32:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by poog502 at 2011-05-25 22:45:15:
你这个混合片段是怎么得到的？有特异引物吗？有引物的话就可以让测序公司测通即可。但你的混合属的片段是怎么搞的，测出来不知道是哪个物种的。

是通过特异性引物扩增的~
赞一下 回复此楼
人生如戏~戏如人生
7楼2011-05-26 09:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-05-26 08:11:11:
连载体测，可以得到比较好的结果

连载体建基因文库太费时间了~
赞一下 回复此楼
人生如戏~戏如人生
8楼2011-05-26 09:27:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你那个片段有很多东西吗，连载体，选几十个个克隆跑个pcr，然后跑个垂直电泳，长度可以分的比较开
赞一下 回复此楼
9楼2011-05-26 09:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

dingjunrong(金币+2): 2011-05-26 14:40:55
引用回帖:
Originally posted by dingjunrong at 2011-05-26 09:26:40:
是通过特异性引物扩增的~

既然是特异引物扩增的，怎么说是混合的？是不是你把不同的种的样品混合，然后扩增得到的特异条带。等等，扩增出现了几条带？可以分开回收条带，分别交给公司直接测序。
赞一下 回复此楼
10楼2011-05-26 11:50:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dingjunrong 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:23 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:02 by jCd0dEvKHShX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 13:51 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 13:41 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +3 349506619 2026-08-28 3/150 2026-08-29 10:49 by 木风9012
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭