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琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物出现杂带
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潇乾魂
金虫
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虫号: 924821
注册: 2009-12-10
性别: GG
专业: 环境工程
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琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物出现杂带
我的土壤样品扩展甲烷氧化功能基因A189f-mb661b,退火温度都已经达到60°C,但还是会出现杂带,大概2000kb左右,我一直没有搞明白到底怎么回事?我做过对照,拿纯菌做,没有问题。请高手帮忙解答,谢谢!
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1楼
2011-05-24 14:58:23
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wuzuobin125
铜虫
(小有名气)
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虫号: 529482
注册: 2008-03-20
专业: 系统生物学
楼主,听了大侠们的意见,你的实验进行是否顺利?
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11楼
2011-05-25 16:10:38
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jjxcz
金虫
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注册: 2011-04-21
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专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-24 15:33:49
潇乾魂(金币+3): 我试试吧 2011-05-25 13:16:05
做个T-down PCR看下,设定退火温度55-65,每个循环降0.5度,祝你好运!
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2楼
2011-05-24 15:04:38
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yabxxh
木虫
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虫号: 157001
注册: 2006-01-05
专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★ ★
1949stone(金币+2): 支持上图 2011-05-24 15:34:11
潇乾魂(金币+1): 2011-05-26 16:45:23
哥们,电泳图贴出来先,不然没法分析,
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3楼
2011-05-24 15:33:22
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天使托
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微生物
【答案】应助回帖
★
amisking(金币+1): 你可以做专家顾问 2011-05-24 21:10:04
潇乾魂(金币+2): 2011-05-26 10:30:50
设置一个温度梯度
是非特异性条带太多了,当然了也可以进行切胶纯化的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼
2011-05-24 17:00:13
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