| 查看: 2394 | 回复: 5 | ||||
| 【奖励】 本帖被评价4次，作者天使托增加金币 2.6 个 | ||||
天使托专家顾问 (职业作家)
|
[资源]
一种确定端粒长度的简便方法----ebiotrade
|
|||
|
DNA每复制一次，端粒就缩短一点。一旦端粒消耗殆尽，染色体则易于突变而导致某些疾病如癌症。因此，对于研究人员来说，准确而可重复地测量端粒长度很重要。为此，QIAGEN的研究人员开发出一种简便且自动化的qPCR方法，利用市售的标准化试剂来测量端粒长度。实验证实，这种方法对于外周血细胞是高度重复而准确的。 端粒是真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。形态学上，染色体DNA末端膨大成粒状，像两顶帽子那样盖在染色体两端，因而得名。端粒的主要功能是保护染色体末端不被降解，避免染色体融合，从而维持染色体的稳定性。 DNA每复制一次，端粒就缩短一点。一旦端粒消耗殆尽，染色体则易于突变而导致某些疾病如癌症。因此，对于研究人员来说，准确而可重复地测量端粒长度很重要。 对于端粒长度的测定，目前主要有三种方法：Southern blot，这被认为是金标准方法，但是耗时耗力，且需要大量的DNA；flow-FISH，它综合了流式细胞仪和荧光原位杂交，但技术复杂，且需要完整的细胞才能分析；定量PCR，这种方法简便快速，且灵敏度高，但缺乏标准化。 为此，QIAGEN的研究人员开发出一种简便且自动化的qPCR方法，利用市售的标准化试剂来测量端粒长度。实验证实，这种方法对于外周血细胞是高度重复而准确的。 分析利用了Rotor-Gene SYBR Green Kit，在Rotor-Gene Q实时定量PCR仪上开展。他们用单个参考基因来标准化端粒分析的Ct值。每个样品的端粒长度是基于端粒与单拷贝基因的比值（T/S比值）。端粒长度表示为相对的T/S比值。 这种qPCR方法使用简单，且对于人类外周血细胞重复性高。qPCR分析的结果与金标准Southern blot方法所获得结果的相关性良好，不过，qPCR方法所需的DNA少，只需要1 ng基因组DNA，且分析100个端粒目标只需要90分钟，而Southern blot需要至少2天。 研究人员评估了299名不同年龄（0-99岁）健康个体的端粒。结果表明端粒长度和年龄成负相关。他们还利用Southern blot和qPCR方法对13名个体的端粒长度进行了测定，发现这两种方法的结果之间呈相当高的相关性。 在Rotor-Gene Q循环仪上开展的实时定量PCR为分析端粒长度提供了一种快速而灵敏的方法。它为研究基因组不稳定性、心脏病和中风、癌症发展与治疗提供了一种强大的工具，并将协助研究人员肿瘤发展过程中端粒缩短的程度和重要性。 Rotor-Gene Q以其独特的离心转子式设计成为现今最精确的多功能定量PCR仪之一。每个管子在反应仓中匀速旋转，所有样本在快速热循环过程中都处于均一的温度下。检测过程保持同样的均一性。当管子对准检测光路是，样品就被激发，通过一束短光路快速采集荧光信号。温度和光学的均一性确保灵敏、精确和快速的实时定量PCR分析，同时也减少了样品间差异和边缘效应。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有55人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求合成1,2,4,5-四（溴甲基）苯的方法
已经有3人回复
- 微波介质陶瓷的测试方法问题
已经有10人回复
- 蓝宝石长晶方法
已经有5人回复
- 光遗传学技术荣膺《自然-方法》2010年度生命科学技术
已经有12人回复
- 半导体材料（光电材料方向）表征方法
已经有10人回复
- 不同的干燥方法，对产品溶解性有影响吗
已经有21人回复
- 这种情况，是否需要回信？
已经有6人回复
- 污泥消解方法？？？？？
已经有9人回复
- 测试几种常用化学键分析方法的普适性
已经有8人回复
- 对TS方法找到过渡态后确定产物的疑惑
已经有39人回复
- 怎样确定合成出的未知物质用什么跟踪方法？
已经有7人回复
- 正反向引物长度差别较大可用吗？
已经有8人回复
- 只用一种单体做聚合物的方法和思路
已经有15人回复
- 利用什么方法可以确定掺杂元素究竟进入晶格里面没有？
已经有18人回复
- 请教有什么方法可以确定高分子聚合物的粘结性能呢？
已经有15人回复
天使托
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16332.8
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
2楼2011-05-19 09:18:01
3楼2011-05-19 15:28:32
4楼2011-05-19 16:26:44
5楼2011-05-20 19:18:38
6楼2011-05-20 20:26:11
