24小时热门版块排行榜    

查看: 3690  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

struggle

铁虫 (初入文坛)

[求助] 有关转基因植株的鉴定

各位同仁,我现在做的是小麦转基因的内容,在进行PCR验证的时候,目标带出现的很少,理论上应该是1比3的比例,有可能是什么原因造成的?DNA 的质量、反应体系、引物等?
另外,如果进行SOURTHERN 杂交,小麦籽粒大约需要多少量,因为我们是加代的材料,分蘖比较少,如果取穗子,那最后成熟籽粒就无法进行品质的检测,所以,请大家提出宝贵建议。谢谢了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xn712100

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:15:15
我之前做小麦转基因也碰到类似的现象。我们通常到T1代才进行SOUTHERN检测,主要是用叶片。T0代苗少,无法获得足够多的DNA进行OUTHERN,只做PCR和GUS染色初步检测。
6楼2011-07-18 11:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:14:59
你检测的转基因几代的单株呀,T0 OR  T1 ? 如果是T0代的话那就说明你的阳性率比较低。如果是T1代的话,如果单拷贝理论上是3:1的比例,如果出现这样的情况那就可能是某一个环节出现问题了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2011-05-19 11:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bired

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

肯定不会是3:1的,不用担心。
3楼2011-05-19 16:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxjwishes

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:15:06
为什么要用种子做southern呢,如果看分离比例不能在抗性培养基上筛选吗
pleasemywings,flymeaway.
4楼2011-07-14 15:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 9/450 2026-08-23 10:59 by Tide man
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见