24小时热门版块排行榜    

查看: 3762  |  回复: 6

struggle

铁虫 (初入文坛)

[求助] 有关转基因植株的鉴定

各位同仁,我现在做的是小麦转基因的内容,在进行PCR验证的时候,目标带出现的很少,理论上应该是1比3的比例,有可能是什么原因造成的?DNA 的质量、反应体系、引物等?
另外,如果进行SOURTHERN 杂交,小麦籽粒大约需要多少量,因为我们是加代的材料,分蘖比较少,如果取穗子,那最后成熟籽粒就无法进行品质的检测,所以,请大家提出宝贵建议。谢谢了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:14:59
你检测的转基因几代的单株呀,T0 OR  T1 ? 如果是T0代的话那就说明你的阳性率比较低。如果是T1代的话,如果单拷贝理论上是3:1的比例,如果出现这样的情况那就可能是某一个环节出现问题了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2011-05-19 11:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bired

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

肯定不会是3:1的,不用担心。
3楼2011-05-19 16:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxjwishes

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:15:06
为什么要用种子做southern呢,如果看分离比例不能在抗性培养基上筛选吗
pleasemywings,flymeaway.
4楼2011-07-14 15:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln157408

新虫 (初入文坛)

学习中。。。我也刚做转基因方面,不过是水稻的
活到老,学到老
5楼2011-07-15 22:40:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xn712100

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-22 20:15:15
我之前做小麦转基因也碰到类似的现象。我们通常到T1代才进行SOUTHERN检测,主要是用叶片。T0代苗少,无法获得足够多的DNA进行OUTHERN,只做PCR和GUS染色初步检测。
6楼2011-07-18 11:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xn712100

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你可以尝试找一对基因组引物(扩增片段与你检测的片段大小基本一致)先检测一下模板的质量。
7楼2011-07-18 11:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 struggle 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:14 by Z9YWQ5EAO3qp
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见