24小时热门版块排行榜    

查看: 968  |  回复: 5

cjjsdau

木虫 (职业作家)

[求助] 酶透析

最近粗提昆虫酶液,最后放入缓冲液中透析,连续两次都是有沉淀出现,有遇到这种情况的吗?请问如何解决?
回复此楼
拜托,我的头像不是大苍蝇,这叫松阿扁叶峰
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuguanghai

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

cjjsdau(金币+1): 2011-05-17 15:07:34
你看看你的酶的等电点,pH,以及盐浓度是不是透析前后差很多
你这个浓度应该不高,你加一点甘油试一试
多提供一点信息
2楼2011-05-17 15:00:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjjsdau

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by xuguanghai at 2011-05-17 15:00:56:
你看看你的酶的等电点,pH,以及盐浓度是不是透析前后差很多
你这个浓度应该不高,你加一点甘油试一试
多提供一点信息

谢谢,我是根据实验室常用的方法做的,先用0.2mM磷酸缓冲液研磨虫子,静提一会后8000r离心30min,取上清加固体硫酸铵至饱和度35%,冰浴静置30min,然后再离心30min,收集沉淀加缓冲液溶解,转至透析袋透析,透析液是0.02mM磷酸缓冲液,按理说不应该有沉淀,可是我做了两次还是有沉淀,不知道哪出错了
拜托,我的头像不是大苍蝇,这叫松阿扁叶峰
3楼2011-05-17 15:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuguanghai

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

cjjsdau(金币+1): 2011-05-17 20:39:44
cjjsdau(金币+5): 2011-05-18 08:41:18
引用回帖:
Originally posted by cjjsdau at 2011-05-17 15:11:21:
谢谢,我是根据实验室常用的方法做的,先用0.2mM磷酸缓冲液研磨虫子,静提一会后8000r离心30min,取上清加固体硫酸铵至饱和度35%,冰浴静置30min,然后再离心30min,收集沉淀加缓冲液溶解,转至透析袋透析,透 ...

为什么透析要用0.02mM的buffer?
这个地方沉淀,一个可能就是你盐浓度低,离子化作用弱,导致沉淀,还有一个可能就是你的蛋白等电点就在这附近。
4楼2011-05-17 15:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjjsdau

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by xuguanghai at 2011-05-17 15:48:39:
为什么透析要用0.02mM的buffer?
这个地方沉淀,一个可能就是你盐浓度低,离子化作用弱,导致沉淀,还有一个可能就是你的蛋白等电点就在这附近。

恩,可能是昆虫个体间差异有些大,不能完全按照以前他们做的方法
拜托,我的头像不是大苍蝇,这叫松阿扁叶峰
5楼2011-05-17 15:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gppwfh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cjjsdau(金币+1): 2011-05-17 17:04:07
cjjsdau(金币+2): 2011-05-18 08:41:28
不能完全按照指导的做。你应该考虑蛋白等电点及盐浓度的问题。
6楼2011-05-17 16:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cjjsdau 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +3 CrisMessi 2026-08-18 3/150 2026-08-18 23:38 by 必须成功
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
请填处理意见