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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 血清中中药成分的指纹
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ak2006

木虫 (正式写手)

[求助] 血清中中药成分的指纹

我最近做血清中中药成分的指纹图谱，空白组血清和给药组血清在图谱上没有明显的区别，做了好几种血清的处理方法，但都是没有区别，但在大鼠的尿中能检测出来。请各位高手帮忙分析一下。是不是还是血清的处理不够好？有没有比较好的血清处理方法能使血清中含药成分能更好的富集？
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1楼 2011-05-16 11:51:09
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jwr

木虫 (著名写手)
能不能说的详细一下呀，博士期间，我一师弟是做的这方面的，我也帮了他不少忙的。
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2楼2011-05-16 15:51:13
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xiaoxuanxuan

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-05-16 19:14:25
ak2006(金币+2): 2011-05-16 20:32:58
加热后醇沉　
1、空白血清的制备
实验前小鼠灌服生理盐水 0. 02 mL/ g再制备血清: ① 未处理血清:小鼠摘眼球取血 ,放置30min ,3 000 r/ min离心 10 min ,取上层血清备用; ②56 ℃ 加热30 min（处理血清，离心如前 ,取出血清后置于 56 ℃恒温水槽中加热灭活30 min） ;所得血清再以50 %乙醇沉淀 ,3 000 r/ min 离心 5 min ,分离上清液备用;
2、含药血清制备：给小鼠灌服药物 ,给药后一定时间后取血 ,分离血清 ,再按上述方法处理血清。
如果加热后醇沉，不行可以采用醇沉后加热，就是把上述步骤 ②中反过来做一次试试。
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3楼2011-05-16 16:21:07
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ak2006

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jwr at 2011-05-16 15:51:13:
能不能说的详细一下呀，博士期间，我一师弟是做的这方面的，我也帮了他不少忙的。

我用过甲醇、乙腈、乙酸乙酯、高氯酸这几种方法来处理血清，做液相时空白血清和含药血清图谱上显示没什么差异，中药给药量也挺大的，血清里面应该有东西的，就是检测不出来。请给点意见
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4楼2011-05-16 17:35:40
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ak2006

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoxuanxuan at 2011-05-16 16:21:07:
加热后醇沉　
1、空白血清的制备
实验前小鼠灌服生理盐水 0. 02 mL/ g再制备血清: ① 未处理血清:小鼠摘眼球取血 ,放置30min ,3 000 r/ min离心 10 min ,取上层血清备用; ②56 ℃ 加热30 min（处理血清，离心如 ...

为什么要热后再醇沉？不用灭活吧。你做过，用50%甲醇醇沉效果如何？
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5楼2011-05-16 17:40:04
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你做药里都有哪些成分和检测方法也应该说一下
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6楼2011-05-16 19:04:07
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kousilin

禁虫 (小有名气)
ak2006(金币+1): 2011-05-17 09:25:47
本帖内容被屏蔽
7楼2011-05-16 19:53:35
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ak2006

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 陈林霖 at 2011-05-16 19:04:07:
你做药里都有哪些成分和检测方法也应该说一下

成分主要是异黄酮类和皂苷类，检测方法用HPLC-DAD检测
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8楼2011-05-16 20:12:36
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ak2006(金币+2): 2011-05-16 21:52:21
异黄酮类首过效应比较明显，皂苷的紫外吸收不好，这些因素都会导致检测不到
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9楼2011-05-16 20:50:09
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yidianyangguang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ak2006(金币+1): 2011-05-18 07:00:37
把灌胃液加入血清处理后看看能不能检测出来？
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10楼2011-05-17 22:38:36
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