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ak2006

木虫 (正式写手)

[求助] 血清中中药成分的指纹

我最近做血清中中药成分的指纹图谱,空白组血清和给药组血清在图谱上没有明显的区别,做了好几种血清的处理方法,但都是没有区别,但在大鼠的尿中能检测出来。请各位高手帮忙分析一下。是不是还是血清的处理不够好?有没有比较好的血清处理方法能使血清中含药成分能更好的富集?
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jwr

木虫 (著名写手)

能不能说的详细一下呀,博士期间,我一师弟是做的这方面的,我也帮了他不少忙的。
2楼2011-05-16 15:51:13
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xiaoxuanxuan

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-05-16 19:14:25
ak2006(金币+2): 2011-05-16 20:32:58
加热后醇沉 
1、空白血清的制备
实验前小鼠灌服生理盐水 0. 02 mL/ g再制备血清: ① 未处理血清:小鼠摘眼球取血 ,放置30min ,3 000 r/ min离心 10 min ,取上层血清备用; ②56 ℃ 加热30 min(处理血清,离心如前 ,取出血清后置于 56 ℃恒温水槽中加热灭活30 min) ;所得血清再以50 %乙醇沉淀 ,3 000 r/ min 离心 5 min ,分离上清液备用;
2、含药血清制备:给小鼠灌服药物 ,给药后一定时间后取血 ,分离血清 ,再按上述方法处理血清。
如果加热后醇沉,不行可以采用醇沉后加热,就是把上述步骤 ②中反过来做一次试试。
3楼2011-05-16 16:21:07
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ak2006

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jwr at 2011-05-16 15:51:13:
能不能说的详细一下呀,博士期间,我一师弟是做的这方面的,我也帮了他不少忙的。

我用过甲醇、乙腈、乙酸乙酯、高氯酸这几种方法来处理血清,做液相时空白血清和含药血清图谱上显示没什么差异,中药给药量也挺大的,血清里面应该有东西的,就是检测不出来。请给点意见
4楼2011-05-16 17:35:40
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ak2006

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaoxuanxuan at 2011-05-16 16:21:07:
加热后醇沉 
1、空白血清的制备
实验前小鼠灌服生理盐水 0. 02 mL/ g再制备血清: ① 未处理血清:小鼠摘眼球取血 ,放置30min ,3 000 r/ min离心 10 min ,取上层血清备用; ②56 ℃ 加热30 min(处理血清,离心如 ...

为什么要热后再醇沉?不用灭活吧。你做过,用50%甲醇醇沉效果如何?
5楼2011-05-16 17:40:04
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你做药里都有哪些成分和检测方法也应该说一下
6楼2011-05-16 19:04:07
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kousilin

禁虫 (小有名气)

ak2006(金币+1): 2011-05-17 09:25:47
本帖内容被屏蔽

7楼2011-05-16 19:53:35
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ak2006

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 陈林霖 at 2011-05-16 19:04:07:
你做药里都有哪些成分和检测方法也应该说一下

成分主要是异黄酮类和皂苷类,检测方法用HPLC-DAD检测
8楼2011-05-16 20:12:36
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ak2006(金币+2): 2011-05-16 21:52:21
异黄酮类首过效应比较明显,皂苷的紫外吸收不好,这些因素都会导致检测不到
9楼2011-05-16 20:50:09
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yidianyangguang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ak2006(金币+1): 2011-05-18 07:00:37
把灌胃液加入血清处理后看看能不能检测出来?
10楼2011-05-17 22:38:36
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