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328121

木虫 (小有名气)

[交流] 中药复方的体内代谢研究思路

我是做药物代谢的，对于研究思路很迷茫。老师也是新手，给不了多大的帮助。
我想请问一下，我做的是复方的体内代谢研究，首先确定前处理方法，前处理方法确定有哪些个原则？前处理确定过后用LC-MS分析，但是TIC图谱上看不到空白血清和给药后血清的变化，又无从下手了。
真心希望各位朋友能指点迷津，非常感谢！
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1楼 2011-11-20 19:18:37
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jenny525520

木虫 (正式写手)
★
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帮你顶一下，我也是做药代的新手，一句话，慢慢摸索~~
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3楼2011-11-22 11:06:37
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
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tuobaohua(金币+2): 鼓励新虫常来科研版交流！ 2011-11-24 12:46:18
没有做过中药复方代谢方面的，但是我感觉首先要看复方提取后在液质中的tic!给药前后变化不大，首先看给药剂量如何，采血点的选取，血浆的前处理

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5楼2011-11-22 18:45:47
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328121

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jiangfyh at 2011-11-22 18:45:47:
没有做过中药复方代谢方面的，但是我感觉首先要看复方提取后在液质中的tic!给药前后变化不大，首先看给药剂量如何，采血点的选取，血浆的前处理
[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]

正常剂量给药HPLC都看不出空白血清和给药后血清的变化，所以加大了给药剂量，20倍正常剂量，但是能看到两三个比较明显的峰，所以走了针LC-MS，那几个明显的峰，提出来的质量数在空白血清中也出现了，而且响应值很大。采血点是1,2,3,4,5,6h，先看代谢物在哪个点岀峰较多，在考虑不同的前处理方法。我有一点不懂：为什么那么大给药剂量后，血清中还是看不见明显变化？吸收真的很差吗？
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6楼2011-11-22 22:08:46
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
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tuobaohua(金币+2): 鼓励新虫常来科研版交流！ 2011-11-23 15:47:03
提取方法用的是什么？液液萃取？？还是蛋白沉淀？先试试蛋白沉淀进液质与空白做对比！使用血清？？？一般用得血浆比较多，不过也要看药物的性质！液质和液相方法是不同的！

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7楼2011-11-23 15:44:32
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
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tuobaohua(金币+1): 鼓励新虫常来提问和帮忙解答问题！ 2011-11-24 12:46:59
中药复方的主要成分是什么黄酮？？还是什么！在质谱检测时使用的是什么源？esi还是apci，使用正离子检测？

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8楼2011-11-23 15:48:46
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patato-tudou

新虫 (小有名气)
★
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路过，祝福一下！
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10楼2011-11-23 15:56:26
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328121

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jiangfyh at 2011-11-23 15:44:32:
提取方法用的是什么？液液萃取？？还是蛋白沉淀？先试试蛋白沉淀进液质与空白做对比！使用血清？？？一般用得血浆比较多，不过也要看药物的性质！液质和液相方法是不同的！
[ 发自手机版 https://emuc ...

甲醇沉淀蛋白法，血清和血浆没什么区别，所以血浆血清都行，复方中主要是黄酮类化合物和香豆素类化合物，还有一些皂苷，采用的是ESI离子源，正负离子都有检测，不知道是不是毛细管温度氮气流速的问题，检测不到代谢物。
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11楼2011-11-24 18:49:36
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
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tuobaohua(金币+1): 鼓励交流！ 2011-11-25 08:03:18
我曾经做过一些黄酮类的质谱条件，但是响应比较低，有个同学做皂苷是乎响应也比较低还不如液相使用蒸发光检测器！主要要看化合物的结构
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12楼2011-11-24 21:13:35
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jiangfyh

金虫 (小有名气)
可以先试试标准品在质谱中的响应来判断一下！
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13楼2011-11-24 21:14:43
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张希昂

金虫 (著名写手)
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tuobaohua(金币+1): 记得常来！ 2011-11-25 08:03:40
很想给点帮助，可惜不太了解，路过，顶一个
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15楼2011-11-24 22:05:54
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328121

木虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by jiangfyh at 2011-11-24 21:14:43:
可以先试试标准品在质谱中的响应来判断一下！

恩  一会准备进几个对照品看看什么情况  不知道是不是大鼠血清样本的干扰太大了
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16楼2011-11-25 19:53:46
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江南的竹

主管区长 (文学泰斗)
………………………………………………………………………………
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17楼2011-12-11 01:07:34
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605108287

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
做复方有很多思路，首先你的提取方式是什么样子的，都会对你后面检测有影响。其次浓度灰常重要，还有指纹图谱的建立对你都会很有帮助，还有血样样品处理的方式，LLE或者 SPE，看过很多文献，都推荐SPE。再者 你血样所稀释的浓度，检测器（UV 的话，波长的选择这一点同时也建立在前面指纹图谱方法中）。药物代谢同类物质具有相似性，你可以看看其他的文章，比较下他们的数据。希望对你有用
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18楼2012-03-01 14:14:26
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简单回复
yingying15882楼
2011-11-20 21:35  
祝福祝福祝福
harbor20104楼
2011-11-22 11:41  
davidfrela9楼
2011-11-23 15:53  
flwhdatou14楼
2011-11-24 21:26  
pangpang15519楼
2012-03-06 20:47  
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