应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 杀死微生物
182/2返回列表上一页12
查看: 764  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看

Virginiaの

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流！:tiger06: 2011-05-14 01:49:36
能杀死微生物的，估计对酶也会有影响。至于是什么化学药品，我就不是很清楚了，不过也很想知道的，想多了解。

我之前用0.2微米的膜过滤50mg/ml的氨卞青霉素没什么问题啊，很快的。
赞一下(1人) 回复此楼
闲看庭前花开花落，漫随天外云卷云舒。
11楼2011-05-13 16:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 那我就先谢谢你。尼克一定要回哦 2011-05-13 20:45:09
占个坑，凌晨1点做完实验网速快再回
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
12楼2011-05-13 19:01:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shensha_sha

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 2011-05-14 16:26:24
在培养基中使用抗生素
赞一下 回复此楼
13楼2011-05-13 21:22:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5, EPI+1): 热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2011-05-14 01:50:08
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-13 19:01:48:
占个坑，凌晨1点做完实验网速快再回

1、        pH值是5.5不算太酸，微生物肯定是能够生长的。
2、        30个小时其实也不一定算长，酶解实验我们用生淀粉酶降解过3天的，完全可以成功（见附件）。
3、        什么底物，是结晶纤维素还是CMC还是预处理甘蔗渣什么的，可溶不可溶？
4、        温度多少？我们试过在40度降解三天的，最后看降解率。如果温度较高，那么微生物比较难生长，但温度太高酶容易失去活力，像50度放30个小时，大多数纤维素酶都会失活大半。这个问题也要注意。
5、        在反应体系中加入抗生素算是浪费，而且微生物那么多，不可能全都抑制完的。加有毒物质也对人不安全，我觉得还是将可溶的东西过滤除菌的好。如果底物不可溶，那就只将酶液过滤，最好用0.22微米的滤膜，用0.45微米的没那么保险。如果觉得过滤速度很慢，就将酶液离心好一些，先用0.45微米滤膜过滤，再用0.22微米的滤膜过滤，速度会较快。30个小时没必要用超净台，微生物主要是酶液里原本带有的，空气中的很少。
6、        酶解反应的时候要塞住瓶口，不然水分蒸发，微生物也会进去。
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
14楼2011-05-14 01:46:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by zhl8101 at 2011-05-13 14:42:49:
能不能具体说说？谢谢

在加入纤维素酶之前，用一定孔径的滤膜对溶液进行过滤除菌；如果你配制的是酶液，也应该进行同样的操作。滤膜的话规格比较多，你可以从网上查查除去细菌所需的滤膜孔径。
赞一下 回复此楼
15楼2011-05-14 09:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by springTT at 2011-05-14 09:26:48:
在加入纤维素酶之前，用一定孔径的滤膜对溶液进行过滤除菌；如果你配制的是酶液，也应该进行同样的操作。滤膜的话规格比较多，你可以从网上查查除去细菌所需的滤膜孔径。

谢谢
回复此楼
16楼2011-05-14 10:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-14 01:46:06:
1、        pH值是5.5不算太酸，微生物肯定是能够生长的。
2、        30个小时其实也不一定算长，酶解实验我们用生淀粉酶降解过3天的，完全可以成功（见附件）。
3、        什么底物，是结晶纤维素还是CMC还是预处理甘蔗渣什么的 ...

谢谢！
我的底物是预处理过的小麦秸秆，水解温度是50度。
谢谢你的建议！
赞一下 回复此楼
17楼2011-05-14 10:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

我还有些想法，不知道你们是不是已经做过了，就多嘴一下，别嫌我啰嗦，如果已经想到了就当我这帖是浮云放过了。
1、温度
    50度对于中温纤维素酶来说，30个小时有可能会失活，之前有没有做过这个酶的温度耐受性？为什么要选用这个温度？在同步糖化发酵中，酵母不能耐受50度的，最好是在30至35度下生长和发酵，也最好最高不高于40度，你这个实验目的是什么？如果只是想辨认这个酶是内切还是外切的话，那么温度可以不处于30-40度，假如后续实验还要用来做同步糖化发酵的话，建议考虑一下降低温度。你选择50度是不是因为这个酶在50度降解速度最快？
2、小麦秸秆
    预处理的时候不知道是不是酸碱处理和爆破，pH值必须处理好，用上缓冲液来溶解，以防止内部的酸碱物质不能及时释放出来，在纤维素降解的时候泡出来破坏了设定好的pH值。还有就是颗粒大小要够小。现在有些机构可以自己做预处理，多请教别人。当然如果是能购买来的话，就不用考虑这些了。
3、酶
    纯化过的还是自己筛选得到的微生物产的粗酶液？假如这个酶是β-葡萄糖苷酶，那么很可能不能降解纤维素，那么这个实验就不用做了，之前有没有什么实验能说明这个酶是不是β-葡萄糖苷酶？
4、过滤
    因为预处理小麦秸秆不能用0.22微米的滤膜过滤，所以可以先将酶和缓冲液过滤，与底物混合之后再调节pH值到5.5，调节的速度可以快一些，不耽误多少时间的。底物和酶的加入有可能会影响体系的pH值的，影响或多或少都会有，混合之前一定要保证pH值是自己所设定的。

反正30个小时不算太长，这个实验还是可以成功的。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
18楼2011-05-14 16:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhl8101 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭