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zhl8101

银虫 (初入文坛)

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[求助] 杀死微生物

我的实验是用纤维素酶水解纤维素，最后检测还原糖含量，但溶液中有微生物，它的生长要消耗糖，会影响我的检测结果。能不能加入一种化学物质杀死微生物，而不对酶产生影响？或者别的方法也行。
水解pH为5.5。
我说的水解就是单纯的酶水解，不是发酵。微生物只会降低我的糖含量。
谢谢了！

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1楼 2011-05-13 10:47:55

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5, EPI+1): 热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2011-05-14 01:50:08

引用回帖:

Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-13 19:01:48:
占个坑，凌晨1点做完实验网速快再回

1、 pH值是5.5不算太酸，微生物肯定是能够生长的。
2、 30个小时其实也不一定算长，酶解实验我们用生淀粉酶降解过3天的，完全可以成功（见附件）。
3、什么底物，是结晶纤维素还是CMC还是预处理甘蔗渣什么的，可溶不可溶？
4、温度多少？我们试过在40度降解三天的，最后看降解率。如果温度较高，那么微生物比较难生长，但温度太高酶容易失去活力，像50度放30个小时，大多数纤维素酶都会失活大半。这个问题也要注意。
5、在反应体系中加入抗生素算是浪费，而且微生物那么多，不可能全都抑制完的。加有毒物质也对人不安全，我觉得还是将可溶的东西过滤除菌的好。如果底物不可溶，那就只将酶液过滤，最好用0.22微米的滤膜，用0.45微米的没那么保险。如果觉得过滤速度很慢，就将酶液离心好一些，先用0.45微米滤膜过滤，再用0.22微米的滤膜过滤，速度会较快。30个小时没必要用超净台，微生物主要是酶液里原本带有的，空气中的很少。
6、酶解反应的时候要塞住瓶口，不然水分蒸发，微生物也会进去。