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zhl8101

银虫 (初入文坛)

[求助] 杀死微生物

我的实验是用纤维素酶水解纤维素,最后检测还原糖含量,但溶液中有微生物,它的生长要消耗糖,会影响我的检测结果。能不能加入一种化学物质杀死微生物,而不对酶产生影响?或者别的方法也行。
水解pH为5.5。
我说的水解就是单纯的酶水解,不是发酵。微生物只会降低我的糖含量。
谢谢了!
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springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:09:01
反应前过滤除菌一下试试。。。
2楼2011-05-13 13:20:17
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:08:53
你的酶解时间多长啊?还能等到微生物生产起来。如果你很在意的话进行无菌操作吧,溶液灭菌。
上善若水,水善利万物而不争
3楼2011-05-13 13:26:15
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by springTT at 2011-05-13 13:20:17:
反应前过滤除菌一下试试。。。

能不能具体说说?谢谢
4楼2011-05-13 14:42:49
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by newtime007 at 2011-05-13 13:26:15:
你的酶解时间多长啊?还能等到微生物生产起来。如果你很在意的话进行无菌操作吧,溶液灭菌。

大概30多个小时。
你说的溶液灭菌是高压蒸汽灭菌吗?我们实验室条件有限,蒸气灭菌后进行的操作还是很容易就引入微生物的。
5楼2011-05-13 14:45:01
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

没有用化学药品杀死微生物的吗?
6楼2011-05-13 14:47:30
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yapingchen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:46:44
wolfebst(金币+1): 鼓励 2011-05-13 23:19:35
1.加入适当的抗生素,这种方法比较简单,比如链霉素等,但也要看你要抑制那种菌。
2.也可以用细菌过滤器除菌。
液体灭菌的话容易导致酶失活。
7楼2011-05-13 15:36:04
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Virginiaの

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:46:39
scelab(金币+5): 欢迎多来交流!:tiger06: 2011-05-14 01:49:17
引用回帖:
Originally posted by zhl8101 at 2011-05-13 14:45:01:
大概30多个小时。
你说的溶液灭菌是高压蒸汽灭菌吗?我们实验室条件有限,蒸气灭菌后进行的操作还是很容易就引入微生物的。

这么长的反应时间。这纤维素酶的活性也太低了。过滤除菌,用0.2微米的过滤膜(有卖的,长得很像陀螺,用注射器吸取要过滤的溶液,打在过滤膜器上,下面接装溶液的容器,还挺好玩的),过滤的时候在超净台里操作。

你说的很容易染菌是在加样进行酶促反应的时候么?你要做的样很多么?如果不是很多的话,直接把水浴锅(小型的那种,调到你想要的反应温度)放在超净台里,加完样了再拿出来呗(这个想法是不是有点疯狂了?)。反正尽量无菌操作吧。
闲看庭前花开花落,漫随天外云卷云舒。
8楼2011-05-13 15:41:51
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yapingchen at 2011-05-13 15:36:04:
1.加入适当的抗生素,这种方法比较简单,比如链霉素等,但也要看你要抑制那种菌。
2.也可以用细菌过滤器除菌。
液体灭菌的话容易导致酶失活。

文献中用的是叠氮化钠,但是叠氮化钠毒性大并且容易爆炸,所以就想找一种能替代的化学药品。
9楼2011-05-13 15:47:58
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by Virginiaの at 2011-05-13 15:41:51:
这么长的反应时间。这纤维素酶的活性也太低了。过滤除菌,用0.2微米的过滤膜(有卖的,长得很像陀螺,用注射器吸取要过滤的溶液,打在过滤膜器上,下面接装溶液的容器,还挺好玩的),过滤的时候在超净台里操作 ...

我加的酶量少。用注射器过滤得费死劲吧,之前用0.45微米的过滤过,挺难的。
文献中抑制微生物用的是叠氮化钠,但是叠氮化钠毒性大并且容易爆炸,所以就想找一种能替代的化学药品。
10楼2011-05-13 15:51:19
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