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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 杀死微生物
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zhl8101

银虫 (初入文坛)

[求助] 杀死微生物

我的实验是用纤维素酶水解纤维素，最后检测还原糖含量，但溶液中有微生物，它的生长要消耗糖，会影响我的检测结果。能不能加入一种化学物质杀死微生物，而不对酶产生影响？或者别的方法也行。
水解pH为5.5。
我说的水解就是单纯的酶水解，不是发酵。微生物只会降低我的糖含量。
谢谢了！
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1楼 2011-05-13 10:47:55
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springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:09:01
反应前过滤除菌一下试试。。。
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2楼2011-05-13 13:20:17
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:08:53
你的酶解时间多长啊？还能等到微生物生产起来。如果你很在意的话进行无菌操作吧，溶液灭菌。
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上善若水，水善利万物而不争
3楼2011-05-13 13:26:15
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zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by springTT at 2011-05-13 13:20:17:
反应前过滤除菌一下试试。。。

能不能具体说说？谢谢
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4楼2011-05-13 14:42:49
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zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by newtime007 at 2011-05-13 13:26:15:
你的酶解时间多长啊？还能等到微生物生产起来。如果你很在意的话进行无菌操作吧，溶液灭菌。

大概30多个小时。
你说的溶液灭菌是高压蒸汽灭菌吗？我们实验室条件有限，蒸气灭菌后进行的操作还是很容易就引入微生物的。
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5楼2011-05-13 14:45:01
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zhl8101

银虫 (初入文坛)
没有用化学药品杀死微生物的吗？
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6楼2011-05-13 14:47:30
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yapingchen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:46:44
wolfebst(金币+1): 鼓励 2011-05-13 23:19:35
1.加入适当的抗生素，这种方法比较简单，比如链霉素等，但也要看你要抑制那种菌。
2.也可以用细菌过滤器除菌。
液体灭菌的话容易导致酶失活。
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7楼2011-05-13 15:36:04
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Virginiaの

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhl8101(金币+1): 2011-05-13 15:46:39
scelab(金币+5): 欢迎多来交流！:tiger06: 2011-05-14 01:49:17
引用回帖:
Originally posted by zhl8101 at 2011-05-13 14:45:01:
大概30多个小时。
你说的溶液灭菌是高压蒸汽灭菌吗？我们实验室条件有限，蒸气灭菌后进行的操作还是很容易就引入微生物的。

这么长的反应时间。这纤维素酶的活性也太低了。过滤除菌，用0.2微米的过滤膜（有卖的，长得很像陀螺，用注射器吸取要过滤的溶液，打在过滤膜器上，下面接装溶液的容器，还挺好玩的），过滤的时候在超净台里操作。

你说的很容易染菌是在加样进行酶促反应的时候么？你要做的样很多么？如果不是很多的话，直接把水浴锅（小型的那种，调到你想要的反应温度）放在超净台里，加完样了再拿出来呗（这个想法是不是有点疯狂了？）。反正尽量无菌操作吧。
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闲看庭前花开花落，漫随天外云卷云舒。
8楼2011-05-13 15:41:51
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zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yapingchen at 2011-05-13 15:36:04:
1.加入适当的抗生素，这种方法比较简单，比如链霉素等，但也要看你要抑制那种菌。
2.也可以用细菌过滤器除菌。
液体灭菌的话容易导致酶失活。

文献中用的是叠氮化钠，但是叠氮化钠毒性大并且容易爆炸，所以就想找一种能替代的化学药品。
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9楼2011-05-13 15:47:58
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zhl8101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by Virginiaの at 2011-05-13 15:41:51:
这么长的反应时间。这纤维素酶的活性也太低了。过滤除菌，用0.2微米的过滤膜（有卖的，长得很像陀螺，用注射器吸取要过滤的溶液，打在过滤膜器上，下面接装溶液的容器，还挺好玩的），过滤的时候在超净台里操作 ...

我加的酶量少。用注射器过滤得费死劲吧，之前用0.45微米的过滤过，挺难的。
文献中抑制微生物用的是叠氮化钠，但是叠氮化钠毒性大并且容易爆炸，所以就想找一种能替代的化学药品。
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10楼2011-05-13 15:51:19
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