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xwsooo

银虫 (小有名气)

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[交流] 酶切条件

最近要开始做酶切了，在研究反应条件，检索文献发现，不同实验中同一种内切酶的孵育时间竟然还不相同，有说过夜的，有的就2,3个小时的，差别还挺大。另外，有说PCR产物要先回收的，而实际上也有直接切下去，很好奇这个反应条件该怎么定下来~~~

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1楼 2011-05-12 22:46:15

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
xwsooo(金币+1): 2011-05-13 07:49:49
dhd997(金币+5): 很对 2011-05-13 09:15:17

你切多久能切好就切多久，别人的只能参考，而且你不同的样品用同一种酶来切不一定切多久就能切好。就是同样的材料，不同的时候提取的纯度也不同，酶切时间也不同，就像我有一个质粒，某次提取的一切就好，另一次提取的老是切不完全。

PCR产物也是，别人的产物或许没有一点儿杂带，而你的就不一定了，人家不回收就切是因为知道能做好，而你自己的还不知道呢，别光看别人怎么做，别人的不一定适合自己。

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