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xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 酶切条件

最近要开始做酶切了,在研究反应条件,检索文献发现,不同实验中同一种内切酶的孵育时间竟然还不相同,有说过夜的,有的就2,3个小时的,差别还挺大。另外,有说PCR产物要先回收的,而实际上也有直接切下去,很好奇这个反应条件该怎么定下来~~~
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
xwsooo(金币+1): 2011-05-13 07:49:49
dhd997(金币+5): 很对 2011-05-13 09:15:17
你切多久能切好就切多久,别人的只能参考,而且你不同的样品用同一种酶来切不一定切多久就能切好。就是同样的材料,不同的时候提取的纯度也不同,酶切时间也不同,就像我有一个质粒,某次提取的一切就好,另一次提取的老是切不完全。

PCR产物也是,别人的产物或许没有一点儿杂带,而你的就不一定了,人家不回收就切是因为知道能做好,而你自己的还不知道呢,别光看别人怎么做,别人的不一定适合自己。
3楼2011-05-13 01:50:06
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