| 查看: 1797 | 回复: 11 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
抽提质粒
|
||||
大家帮忙看看我抽的这个质粒图，看我的质粒有没有断开？因为我每次抽提都书两条以上的条带，没有单条带的，很郁闷。谢谢各位虫友！！！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有62人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
我的现状交流，续：老公辞职读博，我一个人白天工作晚上带孩子，真的累啊！
+1/462
-
坐标深圳，诚征女友
+1/161
-
以色列理工-生物质塑料等催化转化及流体力学方向---全奖博士研究生和科研助理
+2/130
-
华东师范大学 程义云 课题组招2026年博士研究生 - 有机化学、材料化学、高分子合成等
+1/82
-
因为雪而勾起的一些往事
+1/71
-
北京理工大学国家杰青梁军教授课题组招聘2026级博士研究生
+1/30
-
荷兰Utrecht University超快太赫兹光谱王海教授课题招收2026 CSC博士生
+1/29
-
2026年博士申请-全固态锂金属电池方向-聚合物电解质+硫化物电解质
+1/16
-
招若干有分子生物，细胞培养，动物实验背景的人员(中山大学)
+1/11
-
招收26年秋季入学博士生（北科大高精尖学院 力学超材料/机器学习/增材制造相关方向）
+1/8
-
浙江大学-化工学院刘平伟课题组-二维材料/功能聚合物开发
+1/6
-
中山大学院士团队王来源教授课题组招聘博士后
+2/6
-
南开大学齐迹课题组诚聘博士后
+1/4
-
澳大利亚南昆士兰大学（UniSQ）量子点课题组 招收CSC全奖博士生
+1/3
-
CSC 因斯布鲁克大学计算机系 联培/攻博
+1/3
-
上海师范大学邓清海教授课题组招收2026届有机化学博士研究生
+1/3
-
沙特法赫德国王石油与矿产大学（KFUPM）膜分离课题组招生
+1/2
-
澳洲皇家墨尔本理工RMIT招收网安方向CSC PhD
+1/2
-
中国科学技术大学 精准智能化学重点实验室 武建昌课题组招聘博士，博士后
+1/1
-
香港科技大学高寒宇课题组博士后招聘
+1/1
2楼2011-05-05 14:22:55
3楼2011-05-05 14:29:35
4楼2011-05-05 15:02:13
5楼2011-05-05 15:32:20
6楼2011-05-05 15:36:58
7楼2011-05-05 16:15:26
8楼2011-05-05 19:36:44
9楼2011-05-07 13:03:23
10楼2011-05-07 14:05:06
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:58:21
dhd997(金币+5, EPI+1): 够热心 2011-05-07 17:46:03
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:58:21
dhd997(金币+5, EPI+1): 够热心 2011-05-07 17:46:03
|
正常质粒被提取后，会有三种形态：分别是超螺旋形、开环型、线型。三种质粒因结构不同，在凝胶电泳时的速度也会不同，超螺旋形跑的最快，其次是线型，最后是开环型。具体相关资料如下： 从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤:培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可以破坏菌体细胞壁,十二烷基磺酸钠(SDS)和Triton X-100可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后,细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上,同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多,易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性,而共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA，简称cccDNA)的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DNA片段难以复性,而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起,而质粒DNA双链又恢复原状,重新形成天然的超螺旋分子,并以溶解状态存在于液相中。 在细菌细胞内,共价闭环质粒以超螺旋形式存在。在提取质粒过程中，除了超螺旋DNA外，还会产生其它形式的质粒DNA。如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成松驰型的环状分子,称开环DNA(Open circular DNA, 简称 ocDNA)；如果质粒DNA的两条链在同一处断裂,则形成线状DNA(Linear DNA)。当提取的质粒DNA电泳时,同一质粒DNA其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳动速度快。 |
11楼2011-05-07 15:54:36
12楼2011-05-11 17:48:01