| 查看: 1805 | 回复: 11 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
抽提质粒
|
||||
大家帮忙看看我抽的这个质粒图，看我的质粒有没有断开？因为我每次抽提都书两条以上的条带，没有单条带的，很郁闷。谢谢各位虫友！！！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有167人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
湘潭大学化学学院陈华杰教授课题组招收有机/高分子方向的博士研究生
+1/81
-
真诚相亲
+1/81
-
招收26年资源与环境领域、生物质生物转化、生物技术等方向博士研究生
+1/79
-
中国地质大学（武汉）—国家级青年人才杨明教授组-招收博士-新能源材料化学及催化材料
+1/78
-
因为雪而勾起的一些往事
+1/65
-
南昌大学药学博士招生
+1/40
-
陕西师范大学应用表面与胶体化学教育部重点实验室刘静教授课题组招收硕/博士生
+2/40
-
南京理工大学优青课题组招收2026年博士1名（电催化方向）
+2/40
-
数学与应用数学、非线性动力学、计算流体力学、控制工程、岩石力学相关专业博士招生
+1/34
-
国家青年人才叶立群教授课题组招收2026级博士研究生
+1/32
-
青岛大学 丁欣 课题组 招收2026秋化学博士1名
+1/31
-
医学检验方向招收申请考核博士研究生
+2/30
-
博士/硕士招生
+1/15
-
澳门科技大学2026年数学博士招生——计算物理与数学课题组: 相场与计算流体动力学
+1/12
-
长江大学武汉校区诚招工程热物理、油气、电气等新能源博士-2025
+1/10
-
QS Top-88悉尼科技大学数据科学/AI 招收2026年入学 校奖 博士生2名，3月底截止
+1/10
-
【陕西师范大学】催化化学课题组2026年招收博士后/讲师/副高
+1/9
-
招若干有分子生物，细胞培养，动物实验背景的人员(中山大学)
+1/7
-
澳大利亚南昆士兰大学（UniSQ）量子点课题组 招收CSC全奖博士生
+1/2
-
兰州大学物理学院韩卫华教授课题组招收 2026年博士研究生 (物理、电子以及核能源方向)
+1/1
2楼2011-05-05 14:22:55
3楼2011-05-05 14:29:35
4楼2011-05-05 15:02:13
5楼2011-05-05 15:32:20
6楼2011-05-05 15:36:58
7楼2011-05-05 16:15:26
8楼2011-05-05 19:36:44
9楼2011-05-07 13:03:23
10楼2011-05-07 14:05:06
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:58:21
dhd997(金币+5, EPI+1): 够热心 2011-05-07 17:46:03
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:58:21
dhd997(金币+5, EPI+1): 够热心 2011-05-07 17:46:03
|
正常质粒被提取后，会有三种形态：分别是超螺旋形、开环型、线型。三种质粒因结构不同，在凝胶电泳时的速度也会不同，超螺旋形跑的最快，其次是线型，最后是开环型。具体相关资料如下： 从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤:培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可以破坏菌体细胞壁,十二烷基磺酸钠(SDS)和Triton X-100可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后,细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上,同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多,易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性,而共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA，简称cccDNA)的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DNA片段难以复性,而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起,而质粒DNA双链又恢复原状,重新形成天然的超螺旋分子,并以溶解状态存在于液相中。 在细菌细胞内,共价闭环质粒以超螺旋形式存在。在提取质粒过程中，除了超螺旋DNA外，还会产生其它形式的质粒DNA。如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成松驰型的环状分子,称开环DNA(Open circular DNA, 简称 ocDNA)；如果质粒DNA的两条链在同一处断裂,则形成线状DNA(Linear DNA)。当提取的质粒DNA电泳时,同一质粒DNA其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳动速度快。 |
11楼2011-05-07 15:54:36
12楼2011-05-11 17:48:01