应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 抽提质粒
121/1返回列表
查看: 2355  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

475502411

铜虫 (著名写手)

[交流] 抽提质粒

大家帮忙看看我抽的这个质粒图，看我的质粒有没有断开？因为我每次抽提都书两条以上的条带，没有单条带的，很郁闷。谢谢各位虫友！！！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-05-05 14:21:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+1): 2011-05-05 14:33:30
这个没什么关系的，不影响下一步实验的
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-05 14:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
提的质粒一般也不会只有一条带
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-05-05 14:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuguanghai

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-05 16:51:01
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:52:12
看你用什么方法裂解了
一般用碱裂解的话就是2-3条带，质粒，复制的中间体，开环的质粒，一般质粒比例只要大于85%就可以后续试验了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-05 15:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanying198

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
没有断开吧，如果有的话怎么没见最下面有带呢
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-05-05 15:32:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
正常现象，如果你只提出一条带，结果反而奇怪了
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-05-05 15:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangds

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
质粒提取没有问题，电泳条件需要改变
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-05-05 16:15:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的质粒提的可以了，跑胶只要能看到就行，一般没多大的影响，有2-3条带是正常的，技术好的有1条也是可以理解的
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-05-05 19:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
谢谢各位指教
回复此楼
9楼2011-05-07 13:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

springTT

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-05-07 17:56:02
我实验室一般都用碱裂解法提取质粒，提出的质粒一般都是两条带，有时候还会有三条带的
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2011-05-07 14:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
475502411(金币+2): 2011-05-07 15:58:21
dhd997(金币+5, EPI+1): 够热心 2011-05-07 17:46:03
引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-05-05 14:21:44:
大家帮忙看看我抽的这个质粒图，看我的质粒有没有断开？因为我每次抽提都书两条以上的条带，没有单条带的，很郁闷。谢谢各位虫友！！！！

正常质粒被提取后，会有三种形态：分别是超螺旋形、开环型、线型。三种质粒因结构不同，在凝胶电泳时的速度也会不同，超螺旋形跑的最快，其次是线型，最后是开环型。具体相关资料如下：

      从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤:培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可以破坏菌体细胞壁,十二烷基磺酸钠(SDS)和Triton X-100可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后,细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上,同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多,易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性,而共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA，简称cccDNA)的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DNA片段难以复性,而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起,而质粒DNA双链又恢复原状,重新形成天然的超螺旋分子,并以溶解状态存在于液相中。
      在细菌细胞内,共价闭环质粒以超螺旋形式存在。在提取质粒过程中，除了超螺旋DNA外，还会产生其它形式的质粒DNA。如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成松驰型的环状分子,称开环DNA(Open circular DNA, 简称 ocDNA)；如果质粒DNA的两条链在同一处断裂,则形成线状DNA(Linear DNA)。当提取的质粒DNA电泳时,同一质粒DNA其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳动速度快。
赞一下(2人) 回复此楼
11楼2011-05-07 15:54:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chachaxionga

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
质粒会有不同的构象，所以迁移速度也会不同，出来这样的情况也还算是合理可以解释的，但是一般也还是一条带的
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-05-11 17:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 475502411 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[文学芳草园] 阿姨 +3 汪汪锅 2026-08-09 3/150 2026-08-13 16:56 by 410610288
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 6/300 2026-08-13 15:34 by 高飞的梦想
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭