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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教EHA101、EHA105、PMP90三种农杆菌的区别
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 请教EHA101、EHA105、PMP90三种农杆菌的区别

目前实验室有EHA101、EHA105、PMP90三种农杆菌，我要转化拟南芥和烟草，平时都用PMP90感受态，现在用完了，但是还有很多EHA101和EHA105农杆菌感受态，请问虫友们，他们三个的区别是什么？我可不可以使用EHA101和EHA105感受态电转质粒，然后转化拟南芥和烟草？？？
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追梦的人
1楼 2011-05-04 17:43:45
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嘣哆—abc

铁杆木虫 (著名写手)
E H A 1 0 5 菌株由E H A 1 0 1 菌株改造而来，为C58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105 (pTiBo542DTDN A ) ， 此质粒含有v i r 基因( v i r 基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移）。PMP90的不清楚。前两者是可以转烟草的。详细的可查一下相关商品说明。（https://wenku.baidu.com/view/fefce953b9d528ea80c7798b.html）
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笃行，自信，奋进
5楼2019-04-23 09:53:50
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xinxinxuezi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-05-04 18:49:15
zxd95(金币+5): 谢谢！我们实验室的是C58C1 pMP90。EHA105电转后，摇菌28度、12h就摇出来了，这正常吗?C58C1 pMP90 28度需要36h才能摇出来。 2011-05-04 21:05:01
就我所知,PMP90不是一种农杆菌,只是一个辅助质粒,用于协助小质粒转化.你用的PMP90菌株是不是指C58C1 pMP90 或GV3101(pMP90)? 如果你转化的是大质粒(大于5KB),用EHA101和EHA105感受态电转没有问题.
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2楼2011-05-04 18:41:53
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xinxinxuezi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-05-05 09:09:38
zxd95(金币+5): 谢谢！ 2011-05-05 10:15:08
不同农杆菌生长速度不一样.我也遇到过类似情况,但最终鉴定结果是对的.建议你多加几种抗生素,再挑菌PCR鉴定一下,PCR阳性的你就可以放心了.
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3楼2011-05-04 22:30:27
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jxcydm

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 同意！最好不要换。 2011-07-20 16:33:05
各种不同的农杆菌对宿主的侵染能力是不一的，LZ可以去查查，质料转入农杆菌还是简单的。如果以前那个农杆菌做得出来，建议不要换，使用以前的农杆菌再做感受态，再转化载体。
PS：你们不会用以前有载体的农杆菌再扩培一下，再保下种，这样多省事！
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4楼2011-07-20 10:27:31
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