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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有测过成骨细胞碱性磷酸酶的大师么？
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20066954

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有测过成骨细胞碱性磷酸酶的大师么？

哪位大师测过成骨细胞碱性磷酸酶啊，怎么测的呢？
我有Triton X100 裂解了细胞，然后用细胞刮将细胞刮如离心管中离心，取上清液测定，用的是南京建成的ALP试剂盒~在酶标仪下测定吸光度值，但是测不出数据~请大师指导~
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1楼 2011-05-01 16:05:38
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

20066954(金币+1): 免疫组化和荧光只能半定量吧 2011-05-03 10:07:45
要是操作步骤都对了的话
有可能是细胞数目不多
引起的阳性细胞不足引物测量误差太大
为什么不用免疫组化或者是免疫荧光那
这两种对少量和大量的细胞的免疫鉴定还是很好的
并且还有图片
对于你发文章也很有帮助的
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2011-05-03 09:05:52
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20066954

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-05-03 09:05:52:
要是操作步骤都对了的话
有可能是细胞数目不多
引起的阳性细胞不足引物测量误差太大
为什么不用免疫组化或者是免疫荧光那
这两种对少量和大量的细胞的免疫鉴定还是很好的
并且还有图片
对于你发文章也很有帮 ...

免疫组化和免疫荧光可以定量么？还是半定量啊
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3楼2011-05-03 10:07:03
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

20066954(金币+2): 谢谢 2011-05-05 09:22:54
20066954(金币+2): 2011-06-01 09:29:34
引用回帖:
Originally posted by 20066954 at 2011-05-03 10:07:03:
免疫组化和免疫荧光可以定量么？还是半定量啊

可以在共聚焦上做荧光定量的
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
4楼2011-05-03 16:41:21
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
并且
如果阳性细胞数目不多的话
在酶标仪上测出来OD很低的话
酶标仪的OD数据是很难有说服力的
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
5楼2011-05-03 16:45:46
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妙语1989

金虫 (小有名气)
我们的直接用0.1%的Trizol-100加进去以后，再反复冻融两次，然后将其吸出，12000转4度离心5分钟，然后取上清测ALP值，不过我们用的是pNPP法测的ALP
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恶魔快跑
6楼2013-07-16 21:26:47
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恶魔快跑

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 妙语1989 at 2013-07-16 21:26:47
我们的直接用0.1%的Trizol-100加进去以后，再反复冻融两次，然后将其吸出，12000转4度离心5分钟，然后取上清测ALP值，不过我们用的是pNPP法测的ALP

你好，我最近也打算做成骨细胞碱性磷酸酶的测定， 想用PNPP法，请问下你当时买的哪家公司的PNPP呢？我在sigma上看了下试剂
p-Nitrophenyl Phosphate Liquid Substrate System liquid (Sigma) 不知道这个可不可以直接用呢？谢谢啦
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7楼2014-04-24 16:28:29
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cyn1632349

新虫 (初入文坛)
我也用建成的，测不出数据，也找不到哪里错误了

发自小木虫IOS客户端
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8楼2017-07-08 06:50:21
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