24小时热门版块排行榜    

查看: 2157  |  回复: 4

康群招

新虫 (初入文坛)

[求助] (求助)请问有谁做过水蛭的凝血酶效价测定 已有2人参与

请问有谁做过水蛭的凝血酶效价测定,新手上路,想就试验中出现的几个问题请教一下。

1、水蛭药材(鉴定为蚂蝗)按2010版药典的方法测定凝血酶效价时,在加入纤维蛋白原后即出现絮状沉淀,且粘壁?前后重复了4次结果都一样。而我们做的水蛭水提醇沉的浸膏却没有这问题,能正常测定。

2、测定用的Tris-Hcl,生理盐水,纤维蛋白原,凝血酶都是新配的。

3、原来用的凝血酶有标示10单位/mg,现在买的凝血酶只标示了560IU/支,请问该怎么配制?纤维蛋白原瓶上标示的凝固物含量61%,请问这是指纯度吗?

高人指点
回复此楼
Knowing Something of Everything and Everything of Something
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clcl88

银虫 (小有名气)

不知道你找到答案没有啊?救救我也。。。刚接手做这个。。。怎么下手啊。。。有相关分享一下。。。。感激不尽啊。。。。。
2楼2013-09-03 14:18:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李-大鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

试测一下水蛭提取液的PH,可能是因为提取液的酸碱度问题,调到5.0左右就没问题了。以前我也遇到过这种问题,你去百度一下水蛭含量测定,有很多文献是关于水蛭提取液PH对含量测定影响的研究
至于配制凝血酶溶液的浓度...我这边也纠结了很久,最后是这样干的,先把整瓶冻干粉拿去离心,让粉都沉在瓶底,然后加1ml生理盐水,使成560iu/ml,作为贮备液,你可以根据用量选择取多少贮备液出来稀释成10u/ml。至于缓冲液取就直接取纤维白原0.25g,溶于pH7.85的50mL的Tris-HCI缓冲液中,得0.5%的纤维蛋白原溶液。
希望可以帮到你,我也是半桶水,因为我这边用的是SIGMA的凝血酶,关于它浓度的问题我也伤透脑筋,现在还在纠结,求大神指点!!!
3楼2014-06-03 11:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7899014as

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

先把整瓶冻干粉拿去离心,让粉都沉在瓶底,然后加1ml生理盐水,使成560iu/ml,作为贮备液,你可以根据用量选择取多少贮备液出来稀释成
4楼2018-06-06 11:43:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7899014as

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

在37℃水浴中加热溶解牛纤维蛋白原,若仍有絮状物,可能是部分未溶的杂质,过滤去除即可。至于Sigma凝血酶瓶身上注明的1KU each,应该是每瓶凝血酶的单位是1000 U。用灭菌的一次性针头注射器吸取适量的缓冲液(如5ml)注入瓶中,混匀后吸出,再用一次性过滤器滤出凝血酶溶液置于灭菌离心管中,即得到浓度为200 U/ml(以5ml为例)的凝血酶溶液,冰箱4℃保存。使用时从冰箱取出,稀释成40 U/ml就可以了。
5楼2018-06-06 14:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 康群招 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 听说今天filecode变了 +4 布布和一二 2026-08-06 7/350 2026-08-06 17:06 by wdc28
[基金申请] 基金中了 +3 laoda193707 2026-08-06 3/150 2026-08-06 16:52 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +7 布布和一二 2026-08-06 10/500 2026-08-06 16:22 by janehuiminli
[基金申请] filecode +8 等待解的谜 2026-08-06 12/600 2026-08-06 16:11 by janehuiminli
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +4 Tide man 2026-08-06 5/250 2026-08-06 16:08 by janehuiminli
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
请填处理意见