24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1711  |  回复: 13
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wzc4884

金虫 (正式写手)

[求助] 求PCR解!谢谢!

大家好,求解PCR,希望大家指点一下。附件是我今天做的PCR结果。泳道14是阴性PCR对照即模板是2微升二次水,泳道11、12是阳性PCR结果,泳道2至10是待检验的菌液,(其中菌液是从构建的重组质粒中转化BL21DE3后,挑取单克隆摇起的菌液,直接加2微升菌液进行的PCR)。请大家帮助分析下,是否是阳性结果呢?还是根本就是假阳性的单克隆呢?谢谢了!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
1949stone(金币+4): 鼓励 2011-04-28 19:05:08
结果不明显,验证组与阳性对照差别太大,而且大小也不大对。
如果我做的话,会选择从头开始的。
PS:菌液PCR无疑是目前筛选最迅速的方法。准确性相对来说也是很高的。楼主方法没问题,继续坚持。可能是连接这块没做好。
Thank-you,so-blue.
13楼2011-04-28 18:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-28 19:03:10
1有可能是对的,其他的大小和你阳性有差别,建议1提质粒酶切验证
在等待中涅槃重生
2楼2011-04-28 16:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

wzc4884(金币+1): 谢谢! 2011-04-28 16:35:36
说错了,是第二道可能是对的
在等待中涅槃重生
3楼2011-04-28 16:16:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by wzc4884 at 2011-04-28 15:50:14:
大家好,求解PCR,希望大家指点一下。附件是我今天做的PCR结果。泳道14是阴性PCR对照即模板是2微升二次水,泳道11、12是阳性PCR结果,泳道2至10是待检验的菌液,(其中菌液是从构建的重组质粒中转化BL21DE3后,挑 ...

我也举得泳道2(maker右边第一个)是对的。可以提质粒,跟载体一起跑胶,跑久点,如果是重组质粒,会比载体跑得慢,从胶上可以看出来。之后再酶切最后验证。
4楼2011-04-28 16:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见