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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 菌种保藏问题
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[交流] 菌种保藏问题 已有4人参与

各位虫子们
我做了一个克隆，蛋白表达后酶活还不错，挺高的
在斜面和甘油管分别保藏
然后斜面上重新活化后酶活重新测出来差不多
但是菌种保藏管理接出来的再测发现酶活很低很低
大家知道这是为什么吗？
大家一起遇到过这种情况吗？
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我还年轻，我要上路！
1楼 2011-04-25 10:19:13
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
自己顶啊！
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我还年轻，我要上路！
2楼2011-04-25 20:58:08
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
没有碰到过，按道理说应该是一样的啊？！还是顶一下
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3楼2011-04-25 21:51:15
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)
菌使用-80度保藏吗？
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4楼2011-04-25 21:52:03
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ruth_3912834 at 2011-04-25 21:52:03:
菌使用-80度保藏吗？

是在-80度保藏的啊！
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我还年轻，我要上路！
5楼2011-04-26 23:03:15
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花的泪

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
甘油浓度是多少？会不会太低了，导致菌株在冻存过程中死亡
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6楼2011-04-29 16:30:35
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
有没有划板活化一下？
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你的日子如何，你的力量也必如何！
7楼2011-04-29 17:03:01
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夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫
你好同学，你的菌种是不是重组质粒导入宿主细胞。表达量很高，然后用甘油保菌，放入-80.重新活化后表达量变低，我遇到同样的，有看过讲，这种重组保菌质粒会丢失。可以试着保菌甘油量在10%以下。菌体浓度不要过高吧，最近我正在试着做做，看能不能这种保菌会好点。楼主加油
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Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
8楼2014-04-25 15:33:25
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