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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[交流] 菌种保藏问题 已有4人参与

各位虫子们
我做了一个克隆,蛋白表达后酶活还不错,挺高的
在斜面和甘油管分别保藏
然后斜面上重新活化后酶活重新测出来差不多
但是菌种保藏管理接出来的再测发现酶活很低很低
大家知道这是为什么吗?
大家一起遇到过这种情况吗?
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我还年轻,我要上路!
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

自己顶啊!
我还年轻,我要上路!
2楼2011-04-25 20:58:08
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
没有碰到过,按道理说应该是一样的啊?!还是顶一下
3楼2011-04-25 21:51:15
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)

菌使用-80度保藏吗?
4楼2011-04-25 21:52:03
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ruth_3912834 at 2011-04-25 21:52:03:
菌使用-80度保藏吗?

是在-80度保藏的啊!
我还年轻,我要上路!
5楼2011-04-26 23:03:15
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花的泪

银虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
甘油浓度是多少?会不会太低了,导致菌株在冻存过程中死亡
6楼2011-04-29 16:30:35
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sxxuan

金虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
有没有划板活化一下?
你的日子如何,你的力量也必如何!
7楼2011-04-29 17:03:01
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夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

你好同学,你的菌种是不是重组质粒导入宿主细胞。表达量很高,然后用甘油保菌,放入-80.重新活化后表达量变低,我遇到同样的,有看过讲,这种重组保菌质粒会丢失。可以试着保菌甘油量在10%以下。菌体浓度不要过高吧,最近我正在试着做做,看能不能这种保菌会好点。楼主加油
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
8楼2014-04-25 15:33:25
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