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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 材料表征测试 » 【求助】高分子胶束TEM负染色的问题
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AIOLOS7276

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】高分子胶束TEM负染色的问题

我的胶束做TEM，用磷钨酸染色，得到几十个纳米的球（与SEM和DLS得到的结果吻合），粒子是黑色的，但实验室的人说这个不是胶束，因为负染色的话背景是黑的，高分子胶束的白色的，我得到的图片是磷钨酸聚集了，我看了文献，的确一般都是这样的，但也有人用磷钨酸染色后的TEM胶束是黑的，背景是白的，希望有经验的人士给解答一下，我的TEM图能不能用？
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1楼 2011-04-15 16:56:13
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-04-18 10:07:56
AIOLOS7276(金币+3): 2011-04-18 10:23:07
有条件的话重新制备样品再照吧，复染色的话样品是白的才对，黑球很有可能是负染过程操作不好导致的结果
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2楼2011-04-17 22:12:04
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AIOLOS7276

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2011-04-17 23:12:04:
有条件的话重新制备样品再照吧，复染色的话样品是白的才对，黑球很有可能是负染过程操作不好导致的结果

你说的操作不好，具体指哪些方面？TEM会观察到磷钨酸的聚集吗？我的胶束表面是带氨基的，有人说磷钨酸会和氨基结合从而变成正染色的，不知道您对这个了解吗？
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3楼2011-04-18 10:22:58
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dengyfd(金币+1): 欢迎回帖交流请重新上传图片 谢谢 2011-04-22 22:30:15
引用回帖:
Originally posted by AIOLOS7276 at 2011-04-18 10:22:58:
你说的操作不好，具体指哪些方面？TEM会观察到磷钨酸的聚集吗？我的胶束表面是带氨基的，有人说磷钨酸会和氨基结合从而变成正染色的，不知道您对这个了解吗？

磷钨酸的浓度控制不好或pH控制不好，染色操作不好等原因都可能造成这样的结果，有可能在染色过程中磷钨酸出现结晶而形成黑色颗粒。至于与氨基结合变成正染色没了解过，我们做的东西即使带氨基的做出来也是正常的负染色

这张图片就是我以前负染失败时的照片，不知你的是不是也是这种情况
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4楼2011-04-18 11:55:58
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AIOLOS7276

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2011-04-18 12:55:58:
磷钨酸的浓度控制不好或pH控制不好，染色操作不好等原因都可能造成这样的结果，有可能在染色过程中磷钨酸出现结晶而形成黑色颗粒。至于与氨基结合变成正染色没了解过，我们做的东西即使带氨基的做出来也是正 ...

磷钨酸我用的是1wt%的水溶液，没有调节pH（请问还需要控制pH吗），染色操作的时候有什么需要注意的地方吗？多谢！
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5楼2011-04-18 12:50:11
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
yusen_1982(金币+1): 欢迎讨论！ 2011-04-18 22:50:03
引用回帖:
Originally posted by AIOLOS7276 at 2011-04-18 12:50:11:
磷钨酸我用的是1wt%的水溶液，没有调节pH（请问还需要控制pH吗），染色操作的时候有什么需要注意的地方吗？多谢！

找找文献吧，我们用的是1.5%水溶液，pH6.7，不知你们的操作习惯是怎样的，染色剂不要加太多，染色时间也不要太长
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6楼2011-04-18 17:13:51
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