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pxhcooh

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】wb时β-actin加完发光液不发光?

是不是二抗滴度太低啊,压片时间10min才出来条带...
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tongjinjin

新虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+6): Good!继续加油哦! 2011-05-03 00:37:36
您好,我最近也一直在做WB,β-actin一开始也不出,不过前几天终于出了。我自己总结了一下,第一,上样的蛋白浓度一定要够,例如我就是六孔板细胞,三个孔提一管蛋白,而且超声煮沸的时间一定要足够,一般超声30分钟,煮沸十分钟才上样。第二,抗体浓度,适当加大一抗浓度,有的用到1:200。二抗1:2000.。如果这样条件整张膜都亮 ,在适当降低二抗浓度。第三,转膜的时候,一定掌握好时间,别转过了。第四,不要气馁,再接再厉~祝你成功。个人拙见,仅供参考
5楼2011-05-02 21:07:37
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zjdzhang

禁虫 (小有名气)

pxhcooh(金币+1): 2011-04-27 13:22:04
本帖内容被屏蔽

2楼2011-04-14 12:01:27
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huibo0736

铁虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
pxhcooh(金币+3): 2011-04-21 19:59:40
西瓜(金币+3): 好方法!学习了!虽然帖子旧了,还是要加分滴~ 2011-05-03 00:36:22
这种情况也是很常见的,遇到看不见光的,我直接多压上几张胶片后过夜曝光,总有一张你满意的!我一般压三张!
3楼2011-04-19 20:30:48
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