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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】CCK-8法能否测试药物对细胞的损伤或杀伤？
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chem1984

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】CCK-8法能否测试药物对细胞的损伤或杀伤？

我投了一篇文章，关于一种新合成的药物对癌细胞的杀伤作用，细胞存活率使用CCK-8法进行测试，结果审稿人提出“CCK-8法不适合用来表征细胞损伤或细胞死亡”，我是学化学的，对生物不太了解，真的有这种说法吗？或者应该如何进行反驳？多谢！
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1楼 2011-04-11 16:43:54
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
★
amisking(金币+1, EPI+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-11 20:02:32
chem1984(金币+5): 谢谢！请问LDH表征或者细胞染色体可以进行定量测试吗？即百分之多少的细胞死亡了？ 2011-04-12 08:50:56
引用回帖:
Originally posted by chem1984 at 2011-04-11 16:43:54:
我投了一篇文章，关于一种新合成的药物对癌细胞的杀伤作用，细胞存活率使用CCK-8法进行测试，结果审稿人提出“CCK-8法不适合用来表征细胞损伤或细胞死亡”，我是学化学的，对生物不太了解，真的有这种说法吗？或者 ...

CCK法就是测细胞活力的，是细胞活力的指标之一而已。

审稿人的意思可能是：细胞死亡，损伤还有其他的指标，例如细胞膜透性（LDH表征），细胞染色体等等指标。

估计你需要做这部分实验了。多增加细胞死亡的指标。
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2楼2011-04-11 19:30:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
chem1984(金币+5): 谢谢！MTT和CCK-8这两种方法有本质的区别吗？审稿人会不会指CCK-8不行，而MTT就行？ 2011-04-12 08:54:10
审稿人说得很对，很多人都误把MTT、CCK-8、MTS之类的指标当成增殖或者杀伤的指标，其实这些是反映viability
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3楼2011-04-11 19:32:32
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)
双手赞成
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4楼2011-04-11 23:23:27
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-04-11 19:32:32:
审稿人说得很对，很多人都误把MTT、CCK-8、MTS之类的指标当成增殖或者杀伤的指标，其实这些是反映viability

MTT和CCK-8等的原理其实都差不多
MTT也同样不能作为神马指标，我说了，只能反映viability
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5楼2011-04-12 09:42:58
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)
【请问LDH表征或者细胞染色体可以进行定量测试吗？即百分之多少的细胞死亡了？ 2011-04-12 08:50:56】


MTT法等检测的是细胞线粒体脱氢酶活性，来表征细胞活力大小。

细胞死亡特征有很多，细胞膜透性只是其中指标之一，用胞外的乳酸脱氢酶活力表示。

细胞死亡其他的特征，例如染色体异样，也是指标之一。

最好还有细胞图片对照。说明细胞裂解了或皱缩了等等。

你自己查一查 细胞死亡 关键词，能找到比我说的更多可行的指标。

这些死亡指标 是为了近一步了解 你的药物的作用机理的。！

要不，你怎么讨论你的药物的抑制机理啊？
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6楼2011-04-12 12:44:12
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mamadexiao

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
CCK8是细胞增殖活力的,要看杀伤的话,你可以测点其它的指标,单纯这一个是不能反映问题的...
再补实验吧~
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7楼2011-04-13 18:12:53
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大柏树

禁言 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
8楼2013-03-11 16:19:54
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毕业你好

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以选择Annexin Ⅴ-FITC标记做凋亡实验，也可以选择PI和Calcein-AM双染检测细胞早起、晚期凋亡以及死亡的情况
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9楼2013-09-11 08:21:50
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ywj1986

铜虫 (正式写手)
要补实验
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10楼2014-01-16 18:24:18
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