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本研究以羽衣甘蓝S13bS13b自交不亲和系为试验材料,根据MLPKf2基因的片段,设计基因特异性引物。利用RACE 技术,从羽衣甘蓝的RACE cDNA 文库中分别获得了基因5'和3'克隆端部分序列的长度为1072bp和737bp,然后经过全长拼接,通过设计全长引物进行PCR 得到MLPKf2的全长序列为1630 bp。利用四种酶酶切基因组DNA,进行Southern杂交检测。结果表明,MLPKf2只有一个拷贝。半定量RT-PCR粗略检测MLPKf2的表达水平发现,MLPKf2只在柱头中大量表达,在其他组织中几乎无表达。这不同于先前报道的MLPKf1,MLPKf1是在柱头、叶片和茎中均有分布。 |
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