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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于Westrn blot
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烂铁

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于Westrn blot 已有8人参与

我又一个问题不懂，想问问大家：
一般做Western blot的二抗可以通用么？我的抗原位点是6*His，上海生工告诉我说“其二抗是以一抗为基础（抗原）免疫动物，得到二抗。”所以可不可以用其他的抗原位点的二抗来做6*His的Western blot呢？
谢谢了！
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1楼 2011-04-08 09:55:43
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烂铁

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wutongyu77 at 2011-05-24 19:34:09:
请问楼主个问题
     您的WB结果肯定做出来了吧，我想做WB，但是我没有针对我的精氨酸激酶基因的特异性抗体，那我该怎么办？

要做westrn blot，首先你要知道你的蛋白上面有哪些抗原决定簇啊，像His，V5等，一般载体上面都会带有这些抗原位点的，你看一下质粒图谱就知道。然后你才能根据抗原位点来选择你要使用的抗体是什么。
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11楼2011-05-26 14:33:15
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gyq625

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般不都是辣根过氧化酶标记的二抗吗，我也是做western的，上周也打电话咨询了上海生工的公司，他们说他们那有
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2楼2011-04-08 12:11:14
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gyq625

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不好意思出了点问题，我打电话过去他们western负责人说，他们那有western blot的试剂盒啊，里面二抗什么的都有的，他还说二抗是通用的，买此试剂盒的只需自筹一抗。。。所以，对你提出的疑问表示同问，等待有识之士答疑解惑
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3楼2011-04-08 12:14:43
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yixinling

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-04-08 20:03:06
引用回帖:
Originally posted by 烂铁 at 2011-04-08 09:55:43:
我又一个问题不懂，想问问大家：
一般做Western blot的二抗可以通用么？我的抗原位点是6*His，上海生工告诉我说“其二抗是以一抗为基础（抗原）免疫动物，得到二抗。”所以可不可以用其他的抗原位点的二抗来做6* ...

一抗是什么动物的啊？
二抗总得是抗这个动物的才行啊。
抗原位点不同只要你的一抗上有其他的位点就没问题。
就怕没有哈，所以其实你这个问题不见得不行，但最好不要这么玩。
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4楼2011-04-08 15:23:15
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