24小时热门版块排行榜    

查看: 992  |  回复: 3
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+2, EPI+1): 鼓励自主申请EPI 2011-04-07 17:07:00
1:Tm值合适即可,无需提高,提高有可能就会导致条带亮度减弱或者没有条带
2:循环数其实也和P出的条带有部分关系,关键是看你干什么了, 如果是扩增基因用于下游工作,那么循环数建议多一些,30-35个循环,如果只是为了验证,那么20-25个循环即可。
3:你的杂带比较多,模板用的是什么,可以用基因组当模板,纯度高一些,菌液的话可以少加一些。
4:非特异性带多同时也说明可酶效率太高了,一些没用的带也P出来了,体系中酶量稍微减少一些;
5:其实你图中的亮度很不错了,不过如果要做下游工作也完全没有必要改变Tm值以及其他了,你大批量做一下PCR,然后跑电泳全点,然后切胶纯化将你的目的片段纯化出来即可。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-04-07 17:02:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

相关版块跳转 我要订阅楼主 feiye2214 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见