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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】PAGE电泳求助高手高手高高手
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避免杯具

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PAGE电泳求助高手高手高高手 已有6人参与

我跑的聚丙烯PAGE电泳，Marker总是不好，为什么啊？重影很严重，带多的很。根本不好读板。变性也是95度，8分钟。然后还有染色也不好，背影很重。有哪个高手帮帮我指点下。谢了
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1楼 2011-04-02 16:51:04
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
marker质量不好，page分辨率太高
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2楼2011-04-02 17:08:36
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xuguanghai

木虫 (职业作家)
自己做的胶？
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3楼2011-04-02 17:12:44
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-02 19:58:16
条带直不直呢？ 除了楼上说的marker不好（这点你可以让别人拿你marker试试嘛），也有可能是胶不好～比如胶凝的过快，导致跑的效果差。
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4楼2011-04-02 17:32:58
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避免杯具

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-04-02 17:08:36:
marker质量不好，page分辨率太高

pBR322,都一样的吧，还分质量好坏么？恩，分辨率高 可是我们必须用这个啊
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5楼2011-04-02 18:10:17
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避免杯具

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by xuguanghai at 2011-04-02 17:12:44:
自己做的胶？

恩，自己做的胶  胶没问题
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6楼2011-04-02 18:10:52
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避免杯具

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-04-02 17:32:58:
条带直不直呢？ 除了楼上说的marker不好（这点你可以让别人拿你marker试试嘛），也有可能是胶不好～比如胶凝的过快，导致跑的效果差。

我看他们的Marker也不好，我一般凝胶都凝一下午呢，真郁闷不行了
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7楼2011-04-02 18:12:03
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xuguanghai

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-04-02 19:58:26
引用回帖:
Originally posted by 避免杯具 at 2011-04-02 16:51:04:
我跑的聚丙烯PAGE电泳，Marker总是不好，为什么啊？重影很严重，带多的很。根本不好读板。变性也是95度，8分钟。然后还有染色也不好，背影很重。有哪个高手帮帮我指点下。谢了

我觉得是你的胶有问题可以试一试商品化的胶或者在做一块，胶的影响因素很多，温度，你配置的溶液放置的时间，等问题都会让你的胶效果有很大的差距，
背景很重，你再脱色脱几分钟，一般是15分钟吧
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8楼2011-04-02 19:10:27
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mamadexiao

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
APS是不是有问题啊,胶能凝一下午么??
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9楼2011-04-02 21:40:21
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-04-02 23:01:55
引用回帖:
Originally posted by 避免杯具 at 2011-04-02 16:51:04:
我跑的聚丙烯PAGE电泳，Marker总是不好，为什么啊？重影很严重，带多的很。根本不好读板。变性也是95度，8分钟。然后还有染色也不好，背影很重。有哪个高手帮帮我指点下。谢了

兄弟，以后千万别再说“聚丙烯PAGE电泳”。

变性之后离心了么？

染色用新配置的考马斯亮蓝，小摇床上80rpm 30min OK。

将染液回收，用水洗胶一次。然后再加入水，微波炉煮沸10min，将水倒掉，加入脱色液，一小会儿就脱得干干净净了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2011-04-02 22:49:18
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