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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因插入质粒敲除，为什么质粒有正向插入和反向插入呢
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microz

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因插入质粒敲除，为什么质粒有正向插入和反向插入呢 已有6人参与

在网上看见一个做插入突变的资料，他们将一个基因的500bp片段克隆到质粒中，然后将质粒电转入细菌进行同源重组，理论上单交换就可以敲除基因。但是为什么说质粒有可能正向插入，也可能反向插入呢？
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1楼 2011-03-28 19:56:34
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304842444

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3): good 2011-04-03 08:47:04
参照下Cre/loxP 条件性基因敲除以及非条件基因敲除
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-03-31 13:41:37
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meizishu

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): good 2011-04-03 08:47:16
本帖内容被屏蔽

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lifefly
3楼2011-04-01 17:04:23
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gagalady

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): good 2011-04-03 08:47:28
一个顺时针，一个逆时针
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4楼2011-04-01 17:11:56
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mayonghong

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 欢迎继续交流 2011-04-03 08:47:40
采用双酶切或许就不会出现这种情况了
赞一下(2人) 回复此楼
一生有你
5楼2011-04-02 20:02:42
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microz

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 304842444 at 2011-03-31 13:41:37:
参照下Cre/loxP 条件性基因敲除以及非条件基因敲除

请问，什么叫非条件基因敲除啊
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6楼2011-05-06 21:15:56
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lifefly

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
185906楼: Originally posted by meizishu at 2011-04-01 17:04:23
可能是因为单酶切。一般用双酶切就不会有正，反插入。

单酶切做基因插入时要注意什么？
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7楼2012-06-07 10:30:43
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15261561986

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，能把您看到的这个资料发一份给我吗？在做插入突变，谢谢
赞一下 回复此楼
慢慢来，沉下气来。。
8楼2014-05-19 15:39:26
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