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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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大傻妞

铁虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】请教BL21转化问题

请问在转化的时候,我忘记冰浴20min了,直接将感受态和质粒混在一起热激了,怎么办?会对结果有影响吗?
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roomofxw

木虫 (正式写手)


大傻妞(金币+1): 2011-03-28 14:32:19
已然这样了,还能怎么办,要不直接往下做呗,要不再冰冰再热激
大约是影响转化率吧,表达嘛,能转出来几个就够用了
2楼2011-03-28 14:30:34
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by 大傻妞 at 2011-03-28 14:22:26:
请问在转化的时候,我忘记冰浴20min了,直接将感受态和质粒混在一起热激了,怎么办?会对结果有影响吗?

没问题。大肠杆菌伤得起。我们曾经75℃热激都能用,照样长。
3楼2011-03-28 15:44:58
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chinosaur

木虫 (正式写手)


大傻妞(金币+1): 呵呵,谢谢~虽然错误是经验但以后还是要按规矩来~ 2011-03-29 21:38:20
如果你不是要追求高转化率的话,根本没问题,只有有一个菌转进去了就可以。
我曾经不热激就涂板,一样长了很多斑,我的根据是天根的试剂盒说明书上说,感受态和质粒混合后室温放半个小时也能得到一定的转化效果。
我还有过大量扩增DNA的经历,方法是等OD到0.6的时候把温度调到42度摇过夜,第二天菌体超级的浓,DNA产量有十几毫克每升。
大肠杆菌很皮实的,怎么搞都可以。
当然,最好还是严格按程序来做,这是最基本的
4楼2011-03-28 22:00:28
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