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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重? 已有7人参与

在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin  。首先,这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换,其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开,洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min,出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后,怎么也分不开。怎么办???
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891318029

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
第一个基线漂移的问题,走梯度流过检测器流通池的流动相是在不断的变化,基线自然也是在缓慢的变化,但是要判断是否为正常的。如果基线只是缓慢的朝一个方向漂就正常,否则如果上下跳,并且幅度很大,就不正常。这里要注意基线的自然波动,就是把基线放大到足够大以后,所有的基线都不是我们想要的直线,而是锯齿状的,这是仪器的自然属性,随着足够强的信号峰的出现,原来的锯齿就变成了“平直”。
第二个结构相似的化合物的分离,想要效果好还是需要专用柱,广谱柱的效果只能差强人意。
12楼2012-02-22 11:20:01
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hyyyzyq

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dream意(金币+1): 2011-03-28 10:44:38
1.基线漂移严重的原因可能是进样之前流动相没有平衡好,也有可能是梯度洗脱过程中压力不稳定导致的基线漂移
2.你的乙腈和水的比例是多少呢
2楼2011-03-28 09:59:26
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luojin7653

银虫 (正式写手)

基线漂移可以解决的..多平衡一下吧...
今晚打老虎
3楼2011-03-28 10:23:23
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫

★ ★
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jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-03-28 13:21:48
洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min?
你从水一直到70%,60分钟跑完是吗?
如果是的话,别从水开始,20%也行啊,梯度变得慢一点
欢迎您来药学版~
4楼2011-03-28 12:11:07
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