| 查看: 596 | 回复: 1 | |||
[交流]
【求助/交流】DNA纯化问题，求教师兄师姐 已有1人参与
|
|
我用CTAB法粗提DNA。而后用乙醇沉淀法纯化。纯化后测纯度，得结果是：A260/A280=1.84，A260/A230=1.86.各位师兄师姐还能帮忙分析一下实验结果？应该如何改进？ 因为做到后来我拿PCR产物直接测序时发现总出问题，在排除了PCR本身的问题后，初步猜测应该是模板不纯的原因。请问应该如何改进纯化步骤才能使A260/A230=2呢？ 本人刚开始做实验，经验不足，还请各位师兄师姐多多指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
PCR产物测序是什么问题？有没有从反向再测一下呢？ 我个人觉得如果你直接送PCR产物去测序又总出问题的话，建议你将PCR产物克隆到载体上后再挑单克隆去测序，应该就好了。PCR产物直接测序是会出现一些问题的，比如出现双峰什么的。 如果你成功扩增出大小和预期一样的单一清晰PCR条带（产量够，不弥散），可以从胶上把目的条带切下来，然后提取PCR产物，送去测序，另外同意楼上意 见，建议一端测序出问题以后可以反向换引物测下，如果实在不行再做克隆，毕竟比较费时间。我从胶上纯出来的PCR产物，用的QIAGEN 试剂盒，大小约为300-400bp, 成功测出过几百个样本，大多数都没问题。 |
2楼2011-03-22 09:11:15