| 查看: 576 | 回复: 1 | |||
[交流]
【求助/交流】DNA纯化问题，求教师兄师姐 已有1人参与
|
|
我用CTAB法粗提DNA。而后用乙醇沉淀法纯化。纯化后测纯度，得结果是：A260/A280=1.84，A260/A230=1.86.各位师兄师姐还能帮忙分析一下实验结果？应该如何改进？ 因为做到后来我拿PCR产物直接测序时发现总出问题，在排除了PCR本身的问题后，初步猜测应该是模板不纯的原因。请问应该如何改进纯化步骤才能使A260/A230=2呢？ 本人刚开始做实验，经验不足，还请各位师兄师姐多多指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
PCR产物测序是什么问题？有没有从反向再测一下呢？ 我个人觉得如果你直接送PCR产物去测序又总出问题的话，建议你将PCR产物克隆到载体上后再挑单克隆去测序，应该就好了。PCR产物直接测序是会出现一些问题的，比如出现双峰什么的。 如果你成功扩增出大小和预期一样的单一清晰PCR条带（产量够，不弥散），可以从胶上把目的条带切下来，然后提取PCR产物，送去测序，另外同意楼上意 见，建议一端测序出问题以后可以反向换引物测下，如果实在不行再做克隆，毕竟比较费时间。我从胶上纯出来的PCR产物，用的QIAGEN 试剂盒，大小约为300-400bp, 成功测出过几百个样本，大多数都没问题。 |
2楼2011-03-22 09:11:15
