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_然然

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhangxn2010 at 2011-03-22 12:28:17:
冻存的菌液最好活化一下再摇菌。
甘油保菌一般冻在-80,是结冰的,对细胞不会有太大影响。我们的感受态细胞都是这样放置的

呵呵  谢了 活化是指涂板吗?
我们的甘油保菌一般放在-20
11楼2011-03-23 09:45:22
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-23 09:45:22:
呵呵  谢了 活化是指涂板吗?
我们的甘油保菌一般放在-20

活化指平板划线或涂板,放在-80保存时间会更久一点
一直向前!
12楼2011-03-23 09:56:47
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_然然

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-22 13:18:28:
我以前遇到过这样的问题过,总结一下原因
1.菌种退化,这个就必须重新活化菌种
2.刚活化的菌,必须继代培养四五个周期才能摇起来
3.抗生素的浓度太大
4.培养基的成分,尤其是蛋白胨,我用国药的蛋白胨鱼粉就能 ...

呵呵 O(∩_∩)O谢谢
我想问问  活化菌种你们怎么活化?
          刚活化的菌怎么继代培养?
          我们的最后抗生素浓度是100ug/ml,你们的是多大呀?
13楼2011-03-23 10:03:27
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_然然

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhangxn2010 at 2011-03-23 09:56:47:
活化指平板划线或涂板,放在-80保存时间会更久一点

谢谢   试验顺利哦
14楼2011-03-23 10:04:43
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_然然

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by hulqi at 2011-03-22 17:37:56:
这样需要热激复活

请问什么是热激活?
我们保存的菌放在-20一般都冻了,那在活化的时候应该怎么办?直接融化还是像你说的热激活?
15楼2011-03-23 10:07:20
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wqj1988926

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
活化菌种如果是从-80拿出来的话冻存管,快速溶解后用接种针蘸取后涂布于平板,培养,接着就连续继代
继代就是平板接平板
抗生素浓度看具体是什么抗生素了
风雪夜归人
16楼2011-03-23 13:40:54
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angel_yy

金虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-23 09:43:59:
怎么看呀 刚做这方面不太懂

噬菌体污染的现象主要有
1.培养物裂解(突然的光密度降低,过夜培养后细菌密度很低等)
2.可以在培养液中看到团,块等
3.培养液中出现了稠密的白色泡沫(即使培养液密度很高),即使该摇瓶在桌上放置了很长时间泡沫也没有消失。
4.通过分光光度法观察到:团块,脂肪滴,丝状物,没有棒状细胞
5.噬菌斑检测
6.DNA芯片检测(包括电子芯片技术)
希望会对你有帮助
17楼2011-03-23 16:17:30
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yyw30000

铜虫 (小有名气)

应该是抗生素失活了,长的菌落都是假阳性。
18楼2011-03-23 17:30:51
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yyw30000

铜虫 (小有名气)

很可能是噬菌体,呵呵
19楼2011-03-23 18:18:44
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韩少字进之

银虫 (小有名气)


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菌是用50%甘油保成终浓度为25%,蛋白是用100%甘油保成终浓度为50%
20楼2011-03-23 18:26:26
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