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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】单菌落过夜摇菌为什么摇不出来呀？急求
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_然然

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhangxn2010 at 2011-03-22 12:28:17:
冻存的菌液最好活化一下再摇菌。
甘油保菌一般冻在-80，是结冰的，对细胞不会有太大影响。我们的感受态细胞都是这样放置的

呵呵  谢了 活化是指涂板吗？
我们的甘油保菌一般放在-20
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11楼2011-03-23 09:45:22
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-23 09:45:22:
呵呵  谢了 活化是指涂板吗？
我们的甘油保菌一般放在-20

活化指平板划线或涂板，放在-80保存时间会更久一点
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一直向前！
12楼2011-03-23 09:56:47
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_然然

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-22 13:18:28:
我以前遇到过这样的问题过，总结一下原因
1.菌种退化，这个就必须重新活化菌种
2.刚活化的菌，必须继代培养四五个周期才能摇起来
3.抗生素的浓度太大
4.培养基的成分，尤其是蛋白胨，我用国药的蛋白胨鱼粉就能 ...

呵呵 O(∩_∩)O谢谢
我想问问  活化菌种你们怎么活化？
          刚活化的菌怎么继代培养？
          我们的最后抗生素浓度是100ug/ml，你们的是多大呀？
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13楼2011-03-23 10:03:27
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_然然

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhangxn2010 at 2011-03-23 09:56:47:
活化指平板划线或涂板，放在-80保存时间会更久一点

谢谢   试验顺利哦
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14楼2011-03-23 10:04:43
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_然然

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hulqi at 2011-03-22 17:37:56:
这样需要热激复活

请问什么是热激活？
我们保存的菌放在-20一般都冻了，那在活化的时候应该怎么办？直接融化还是像你说的热激活？
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15楼2011-03-23 10:07:20
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
活化菌种如果是从-80拿出来的话冻存管，快速溶解后用接种针蘸取后涂布于平板，培养，接着就连续继代
继代就是平板接平板
抗生素浓度看具体是什么抗生素了
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风雪夜归人
16楼2011-03-23 13:40:54
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angel_yy

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-23 09:43:59:
怎么看呀 刚做这方面不太懂

噬菌体污染的现象主要有
1．培养物裂解（突然的光密度降低，过夜培养后细菌密度很低等）
2．可以在培养液中看到团，块等
3．培养液中出现了稠密的白色泡沫（即使培养液密度很高），即使该摇瓶在桌上放置了很长时间泡沫也没有消失。
4．通过分光光度法观察到：团块，脂肪滴，丝状物，没有棒状细胞
5．噬菌斑检测
6．DNA芯片检测（包括电子芯片技术）
希望会对你有帮助
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17楼2011-03-23 16:17:30
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yyw30000

铜虫 (小有名气)
应该是抗生素失活了，长的菌落都是假阳性。
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18楼2011-03-23 17:30:51
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yyw30000

铜虫 (小有名气)
很可能是噬菌体，呵呵
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19楼2011-03-23 18:18:44
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韩少字进之

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
菌是用50%甘油保成终浓度为25%，蛋白是用100%甘油保成终浓度为50%
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20楼2011-03-23 18:26:26
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