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wq8212

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】梯度洗脱设置

我在分两种物质的混合物时发现：甲醇：缓冲液=45:55可以分出一个，在2.5min出峰。可是另一个分不出。后来改流动相甲醇：乙腈：缓冲液=20:30:50两种物质均可以分出来。一个在1.6min，一个在7.4min出峰。
想问各位大侠：我想设一个梯度洗脱的方法不知道怎么设我们用的是agilent1200.
我想在0-3min甲醇：缓冲液=45:55，
3-5min甲醇从45降至20；乙腈从0增至30，
5-9min甲醇保持20，乙腈保持30。怎么做。
谢谢各位？还有就是梯度洗脱有必要吗？
而且梯度洗脱的时候压力和流动相在变化的过程中就出峰这样好吗？

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1楼 2011-03-21 09:22:31

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nwxjh

荣誉版主 (文坛精英)

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wq8212(金币+1): 2011-03-21 12:55:36

是啊，你等度7.4分钟都出来了，梯度还要设9分钟，时间上面又没节省，为什么要用梯度了？

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4楼2011-03-21 12:29:14

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80年后

金虫 (正式写手)

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wq8212(金币+3): 2011-03-21 12:55:26

A                B                   C                   D
      methol          buffer             acn                   no
3min 45                55                   0                   0
5min 20                50                30                   0
9min 20                50                30                   0

程序如上面
但是我觉得没必要能等度分开就要等度还是把有机相调节低点分离一下

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2楼2011-03-21 12:23:29

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