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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】MTT时 结果不重复问题
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ydmao2009

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】MTT时 结果不重复问题

各位虫友。现在我做化合物活性实验的时候，想做抗肿瘤活性，采用MTT法，结果就出了很多问题。问题主要体现在 实验不重复。 有一次是阴性组 在0.7左右，我的化合物结果是0.2左右，抑制率大概是80%。结果第二次就不重复了。当然第二次阴性组的读数都是在1.2～1.7以上，而抑制率就为0，实验不重复. 我想问的是，是不是因为阴性组的读数偏大，导致我的实验结果 就出现异常。 我下面是思路是用计数板来控制细胞浓度到10的4～5次方数量级把。请各位做过MTT的虫友帮忙分析下可能的原因。谢谢了
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1楼 2011-03-18 22:58:23
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
ydmao2009(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-19 09:35:24
ydmao2009(金币+2): 谢谢。我感觉是这个问题，但是没法控制程度。不知道是4次方还是6次方细胞为好，每个人说法都不同 2011-03-19 19:28:31
细胞种太密了……
细胞多了就把杀伤力给平均分担了，然后就耐受了，就这么简单的道理~~
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2楼2011-03-18 23:55:05
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)
★
ydmao2009(金币+1):谢谢参与
ydmao2009(金币+1): thank you so much. 2011-03-19 19:29:04
Back up ATP.

The result of the second experiment is not accurate due to the high density of the cell. And it would be better to control the density of cell in a same level so that you can compare the results.
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3楼2011-03-19 02:24:51
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
不知道是4次方还是6次方细胞为好，每个人说法都不同

不同细胞不一样，你控制好对照组在你检测的时间点刚好长满的程度
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4楼2011-03-19 23:07:30
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)
★
ydmao2009(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-19 23:07:30:
不知道是4次方还是6次方细胞为好，每个人说法都不同

不同细胞不一样，你控制好对照组在你检测的时间点刚好长满的程度

我感觉
先用不同浓度种板，用MTT测一下生长曲线，用量就大概知道了，有道理吗？
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5楼2011-04-21 10:47:58
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-04-21 10:47:58:
我感觉
先用不同浓度种板，用MTT测一下生长曲线，用量就大概知道了，有道理吗？

反正不要让细胞长太满，以及每次固定细胞密度即可
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6楼2011-04-21 12:11:29
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