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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】农杆菌转化真菌IM培养基的问题！
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媛媛yang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】农杆菌转化真菌IM培养基的问题！ 已有6人参与

1、IM培养基的pH值是多少？是不是自然pH值？

2、MES的pH值是多少？我看文献是5.3，我就调到了5.3，可是加到IM里不还是不起啥作用吗？加的那么少

3、AS要不要调pH值？

4、我配IM培养基的时候先按照配方配好940毫升不加MES和AS的培养基，用的时候再加入，就像加抗生素似地，这样做对不对？

5、IM培养基中对转化起到关键作用的是哪个成分？MES还是AS？

[ Last edited by 媛媛yang on 2011-3-16 at 10:38 ]
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1楼 2011-03-15 17:48:54
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renjieacat

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我现在刚开始做农杆菌转化，也遇到了您之前遇到的问题，需要求助，如果再做不出来就无法毕业了
1 IM最终的PH是多少，
2 共培养之前的OD是0.4么？
3 筛选培养基覆盖后，两天就长满细菌，该如何处理，
真心谢谢了
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6楼2013-12-10 19:07:06
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媛媛yang

新虫 (初入文坛)
哦，做转化的大侠们，你们在哪？
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2楼2011-03-16 08:58:08
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jxcydm

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-07-20 16:23:07
1、IM培养基的pH值是多少？是不是自然pH值？
没有调过

2、MES的pH值是多少？我看文献是5.3，我就调到了5.3，可是加到IM里不还是不起啥作用吗？加的那么少
没有调过，买来就真接用来配培养基了
3、AS要不要调pH值？

AS溶解要用有机溶剂，怎么调PH，反正我们是没有调过。

4、我配IM培养基的时候先按照配方配好940毫升不加MES和AS的培养基，用的时候再加入，就像加抗生素似地，这样做对不对？

我做的时候是最后定容。

5、IM培养基中对转化起到关键作用的是哪个成分？MES还是AS？
AS


PS：我们实验室是做出来了的，但我用的菌株跟他们的不一样，一直悲剧中！可以的话，还请指教一下啊

[ Last edited by jxcydm on 2011-7-20 at 10:49 ]
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4楼2011-07-20 10:44:38
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佳茗不苦

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我问实验室之前做过的人，他们是
把磷酸氢二钾，磷酸二氢钾，氯化钠，硫酸镁，硫酸铵一起混合加水到800ml，调节PH到5.5，加水到900ml，高压蒸汽灭菌降至50℃；
同时氯化钙，硫酸铁，葡萄糖，MES，甘油混合，加水至100ml,过滤器抽滤除菌；
把上述两种溶液混合再加AS
AS先用DMSO配成100mmol/l的母液，再按照需要加入

我不理解的是：
1 为什么要加到800ml，调节Ph,再加到900ml 而不是直接加到900ml调节ph
2 葡萄糖又不是不耐高温，也不会和其他其反应，为什么也要抽滤除菌

求高手解答！
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5楼2013-06-15 17:26:23
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