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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌培养基
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 真菌培养基

我培养真菌用的发酵培养基在高温灭菌后出现许多沉淀，是什么原因引起的？另外，斜面培养真菌用的是PDA固体琼脂，但是生长很慢，只有几个单菌落，没有连成一片的菌，这是怎么回事？谢谢热心虫友！
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1楼2011-07-19 20:56:00
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

huangdi5217(金币+2): 谢谢！我的发酵培养基含有棉籽饼粉，甘露醇，微量元素，氨基酸，磷酸盐，硫酸镁，是不是这些一起灭菌不好啊？另外灭前pH为5.5左右 2011-07-21 07:40:19
最好将培养基告诉大家,才好帮你分析.
一般培养基灭菌后出现沉淀原因:1培养基中有难溶盐或灭菌后产生难溶盐如钙盐,镁盐.2培养基中蛋白变性,此一般为絮状.3.Ph引起物质理化性质变化产生沉淀.
另外，斜面培养只有几个单菌落,首先检查你的操作有没有问题,如接入的菌多少,培养温度\湿度等条件.2如果上述条件没问题,估计菌种的活力不强,考虑在PDA培养基中加些蛋白.
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上善若水，水善利万物而不争
2楼2011-07-20 09:58:29
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

huangdi5217(金币+1): 谢谢您，我用的是纯水配制的，PDA配制用的是国产的培养基粉末，没有沉淀 2011-07-21 07:41:39
1）楼上这哥们说的挺好的，培养基产生沉淀与配制培养基的水质也有关系，如果用纯水可能就会好点。
2）另，如果是PDA培养基产生沉淀的话可能是马铃薯的细胞沉淀，可以通过放-20℃冻融一次再过滤一下就可以解决啦。
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3楼2011-07-20 13:27:08
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
依照楼主的口气，我猜测楼主用的是PDA固体琼脂培养基，是商品用的粉末制剂，而不是板凳楼说的自己切马铃薯制作的。楼主接种到斜面的时候应该不是涂板，而是用接种环/针，所以并不能用“菌落”这个词。也不能说生长很慢，只能说接种量太少，或者接种很多，但是活力太低不萌发。这不是沙发楼说的加点蛋白质到PDA里就可以解决的，接种少了，即使培养基营养再丰富也就那样，何况PDA营养是很丰富的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-07-20 20:04:09
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-20 20:04:09:
依照楼主的口气，我猜测楼主用的是PDA固体琼脂培养基，是商品用的粉末制剂，而不是板凳楼说的自己切马铃薯制作的。楼主接种到斜面的时候应该不是涂板，而是用接种环/针，所以并不能用“菌落”这个词。也不能说生长 ...

不好意思，您用的不是应助回帖，没法给你金币，不过还想问一下，我用的的确像您说的是接种环接的斜面，长得菌比较稀少，正常情况下应该用什么方法接斜面呢？谢谢了。还有，发酵培养基含有甘露醇，棉籽饼粉，氨基酸，磷酸盐，硫酸镁，微量盐，乳酸，pH5.5，是不是不能放在一起灭菌啊？每次都出现好多沉淀
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5楼2011-07-21 07:45:50
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

huangdi5217(金币+2): 我试过只加一种的，效果不是很明显！ 2011-07-21 17:46:45
你把磷酸盐 ,硫酸镁去掉一样,或只加其中一样灭菌试试,磷酸镁不溶水.
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上善若水，水善利万物而不争
6楼2011-07-21 08:34:28
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
我回帖的时候一般不选择应助，这样已经有一年了。因为一来我的金币已经超过四千，也不用在乎楼主给的几个金币。二来是我不能确保我的回帖能不能帮得上楼主，如果帮得上，自然有版主给奖励，如果帮不上就算了。

我配过培养基含有1%磷酸二氢钠，0.5%七水合硫酸镁，pH5.5，没有沉淀，至于你的沉淀是不是因为产生了磷酸镁，我不知道，如果你用的是磷酸正盐，你试一下换成磷酸氢根，这样换，你的磷元素就能得以保留。

你的微量盐我不知道是什么，我的培养基含有0.05%的硫酸亚铁，没有沉淀。你有没有试过不加营养盐？

棉籽饼粉属于农副产品，含有很多有机物，可以补充碳源和氮源，你有没有将其粉碎过80目筛？因为越碎，与微生物分泌的酶的接触面积越大，越好利用。这个东西你能不能溶解？因为这个东西也是有级别的，你买的是农副产品还是经过酶解的？农副产品是不可溶的，酶解之后可溶。这些网页提到的是不可溶的。
http://www.mmimm.com/BRD8559962/
http://china.makepolo.com/product-detail/6359229.html
http://edu.cnhubei.com/?action-viewnews-itemid-5714
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huangdi5217
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7楼2011-07-21 16:58:25
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
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Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-21 16:58:25:
我回帖的时候一般不选择应助，这样已经有一年了。因为一来我的金币已经超过四千，也不用在乎楼主给的几个金币。二来是我不能确保我的回帖能不能帮得上楼主，如果帮得上，自然有版主给奖励，如果帮不上就算了。

...

我的培养基是磷酸二氢钾，只加了0.1%，而硫酸镁加了0.2%，微量盐里有FeSO4，ZnSO4，MnCl2。棉籽饼粉用的是你提到的第一个生产产商，现在正困惑于沉淀是否对发酵产生影响！
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8楼2011-07-21 17:49:38
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
Originally posted by huangdi5217 at 2011-07-21 17:49:38:
我的培养基是磷酸二氢钾，只加了0.1%，而硫酸镁加了0.2%，微量盐里有FeSO4，ZnSO4，MnCl2。棉籽饼粉用的是你提到的第一个生产产商，现在正困惑于沉淀是否对发酵产生影响！

呵呵，那么就是说你的棉籽粉本身就不溶了？是固体的？有没有粉碎过筛？
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9楼2011-07-21 18:21:18
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-21 18:21:18:
呵呵，那么就是说你的棉籽粉本身就不溶了？是固体的？有没有粉碎过筛？

能溶，但是培养基底层存在不溶性颗粒，我买来的就是固体粉末状啊，现在过了80目筛子
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10楼2011-07-22 07:34:16
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