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媛媛yang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】农杆菌转化真菌IM培养基的问题! 已有6人参与

1、IM培养基的pH值是多少?是不是自然pH值?

2、MES的pH值是多少?我看文献是5.3,我就调到了5.3,可是加到IM里不还是不起啥作用吗?加的那么少

3、AS要不要调pH值?

4、我配IM培养基的时候先按照配方配好940毫升不加MES和AS的培养基,用的时候再加入,就像加抗生素似地,这样做对不对?

5、IM培养基中对转化起到关键作用的是哪个成分?MES还是AS?

[ Last edited by 媛媛yang on 2011-3-16 at 10:38 ]
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jxcydm

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good! 2011-07-20 16:23:07
1、IM培养基的pH值是多少?是不是自然pH值?
没有调过

2、MES的pH值是多少?我看文献是5.3,我就调到了5.3,可是加到IM里不还是不起啥作用吗?加的那么少
没有调过,买来就真接用来配培养基了
3、AS要不要调pH值?

AS溶解要用有机溶剂,怎么调PH,反正我们是没有调过。

4、我配IM培养基的时候先按照配方配好940毫升不加MES和AS的培养基,用的时候再加入,就像加抗生素似地,这样做对不对?

我做的时候是最后定容。

5、IM培养基中对转化起到关键作用的是哪个成分?MES还是AS?
AS


PS:我们实验室是做出来了的,但我用的菌株跟他们的不一样,一直悲剧中!可以的话,还请指教一下啊

[ Last edited by jxcydm on 2011-7-20 at 10:49 ]
4楼2011-07-20 10:44:38
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媛媛yang

新虫 (初入文坛)

哦,做转化的大侠们,你们在哪?
2楼2011-03-16 08:58:08
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佳茗不苦

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我问实验室之前做过的人,他们是
把磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,氯化钠,硫酸镁,硫酸铵一起混合加水到800ml,调节PH到5.5,加水到900ml,高压蒸汽灭菌降至50℃;
同时氯化钙,硫酸铁,葡萄糖,MES,甘油混合,加水至100ml,过滤器抽滤除菌;
把上述两种溶液混合再加AS
AS先用DMSO配成100mmol/l的母液,再按照需要加入

我不理解的是:
1 为什么要加到800ml,调节Ph,再加到900ml 而不是直接加到900ml调节ph
2 葡萄糖又不是不耐高温,也不会和其他其反应,为什么也要抽滤除菌

求高手解答!
5楼2013-06-15 17:26:23
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renjieacat

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我现在刚开始做农杆菌转化,也遇到了您之前遇到的问题,需要求助,如果再做不出来就无法毕业了
1 IM最终的PH是多少,
2 共培养之前的OD是0.4么?
3 筛选培养基覆盖后,两天就长满细菌,该如何处理,
真心谢谢了
6楼2013-12-10 19:07:06
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