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yujingschen

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】未经任何处理的细胞总是死亡率很高,怎么办? 已有3人参与

96孔板染色

我想用trypan blue 直接加入96孔板对细胞进行染色,分析死亡率。可是未经任何处理的细胞总是死亡率很高,请高手指教!

我的具体步骤是:完全吸出细胞培养液,加入40ul台盼蓝燃料,染色3-5分钟后完全吸出染料,镜下观察。会有达到30%的死亡率。用的培养基是商业化的不完全培养基,没孔中150ul!
请高手不吝赐教!感激不尽!
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vivi625

金虫 (初入文坛)

染料要吸除么?
2楼2011-04-17 15:39:57
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Mingn1

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
西瓜(金币+3): 鼓励新虫交流 2011-04-18 10:56:30
培养液要吸除?用试剂盒做是直接吸取悬浮液,加染料染色3分钟然后观察!吸除培养液细胞就会逐渐死亡的
3楼2011-04-17 16:41:48
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萧柏

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-18 10:56:08
染色的时候可以加100ul的无酚红培养基和50ul的染色液,因为你只要吸出培养基后细胞就会开始发生死亡。
欢迎一起交流
4楼2011-04-18 09:26:09
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萧柏

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 萧柏 at 2011-04-18 09:26:09:
染色的时候可以加100ul的无酚红培养基和50ul的染色液,因为你只要吸出培养基后细胞就会开始发生死亡。

还有就是培养基要用无血清无酚红的培养基,因为血清也会对呈色有所干扰,
欢迎一起交流
5楼2011-04-18 11:28:39
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