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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】未经任何处理的细胞总是死亡率很高，怎么办？
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yujingschen

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】未经任何处理的细胞总是死亡率很高，怎么办？ 已有3人参与

96孔板染色

我想用trypan blue 直接加入96孔板对细胞进行染色，分析死亡率。可是未经任何处理的细胞总是死亡率很高，请高手指教！

我的具体步骤是：完全吸出细胞培养液，加入40ul台盼蓝燃料，染色3-5分钟后完全吸出染料，镜下观察。会有达到30%的死亡率。用的培养基是商业化的不完全培养基，没孔中150ul！
请高手不吝赐教！感激不尽！
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1楼 2011-03-10 14:32:19
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vivi625

金虫 (初入文坛)
染料要吸除么？
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2楼2011-04-17 15:39:57
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Mingn1

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西瓜(金币+3): 鼓励新虫交流 2011-04-18 10:56:30
培养液要吸除？用试剂盒做是直接吸取悬浮液，加染料染色3分钟然后观察！吸除培养液细胞就会逐渐死亡的
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3楼2011-04-17 16:41:48
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萧柏

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西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-18 10:56:08
染色的时候可以加100ul的无酚红培养基和50ul的染色液，因为你只要吸出培养基后细胞就会开始发生死亡。
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4楼2011-04-18 09:26:09
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萧柏

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
Originally posted by 萧柏 at 2011-04-18 09:26:09:
染色的时候可以加100ul的无酚红培养基和50ul的染色液，因为你只要吸出培养基后细胞就会开始发生死亡。

还有就是培养基要用无血清无酚红的培养基，因为血清也会对呈色有所干扰，
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5楼2011-04-18 11:28:39
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