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419249049

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】做植物转基因的虫友们,求救啊!

农杆菌侵染为什么要经过小管培养,直接挑单菌落到三角瓶中作为工程菌液可以吗?若不可以,会发生什么问题呢?
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)


★ ★
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lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-03-09 11:06:17
419249049(金币+4): 2011-03-09 13:09:29
there is no problem,
make sure your cells are fresh
reinoculation will give you fresh cells which will make you get more efficient transformation
2楼2011-03-08 20:53:09
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
419249049(金币+4): 2011-03-09 13:09:36
就像做大肠杆菌感受态一样,新鲜的生长旺盛的细胞效率高一些
3楼2011-03-08 22:53:32
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wxf8470

木虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
419249049(金币+4): 2011-03-09 13:09:43
我们直接在板上涂菌,长成片后刮下来,重悬后就拿去侵染了.
4楼2011-03-09 02:43:00
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lxjwishes

银虫 (正式写手)


★ ★
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lstt09nk(金币+1): 有道理,活化一下会更好~ 2011-03-09 11:06:58
419249049(金币+4): 2011-03-09 13:09:49
我们一般是先活菌,就是把冻在冰箱的菌拿出来先摇活,再摇,用第二次摇起来的菌,活性较好@!
5楼2011-03-09 09:02:20
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sxxuan

金虫 (著名写手)



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419249049(金币+4): 2011-03-09 13:09:55
用新鲜的菌液,测一下OD,侵染能力才会高一些。
6楼2011-03-09 09:05:46
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0610616

木虫 (正式写手)


如果做侵染,菌最好活化2-3次,使菌保持最好的活性,提高侵染的效率
7楼2011-03-09 19:34:00
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没有眼泪

铜虫 (初入文坛)



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我们用新鲜的平板,挑菌后三角瓶摇,这样菌液新鲜无杂菌。转化效率会高一些。
8楼2011-03-10 13:46:32
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