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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】引物合成浓度
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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物合成浓度 已有10人参与

我定了两次引物（浓度为4OD），发现用的挺快的，一个月就用了2管，我想下次再定时增加引物浓度（如8OD,10OD），不知道会有什么影响吗？
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1楼 2011-03-08 15:53:01
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-03-08 17:17:32
我说楼主，你吃引物啊（玩笑）！一般4OD，我们回来一管足矣！只需要把基因扩增出来进行下游工作就可以了！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-03-08 17:12:38
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
怎么会呢，你稀释了吗，一般都会加入400微升的te溶解，使用时用一微升就行了
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风雪夜归人
3楼2011-03-08 17:22:19
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫生化熊

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主你用的是够快的啊~~~我一管都用好久啊
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曾经的你/以为只要带着那把青春的长剑和赤子的良心就可以说服自己不出卖理想的灵魂/在最寂寞和不得不流泪的晚上/即使连自己都在笑自己傻/依然拔出怀中的长剑~~~
4楼2011-03-08 17:24:45
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-08 17:22:19:
怎么会呢，你稀释了吗，一般都会加入400微升的te溶解，使用时用一微升就行了

是呀，先用TE稀释到100um的浓度啊，但是按照引物合成单上的说明，没有加那么多量TE的，就加100多微升啊。。。
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5楼2011-03-08 18:37:47
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-08 17:12:38:
我说楼主，你吃引物啊（玩笑）！一般4OD，我们回来一管足矣！只需要把基因扩增出来进行下游工作就可以了！

我也不知道为什么这么快哇，我引物用量2微升（20um浓度）
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6楼2011-03-08 18:38:43
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-03-08 17:24:45:
楼主你用的是够快的啊~~~我一管都用好久啊

我不知道为什么哇
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7楼2011-03-08 18:39:15
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xu_hai

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 呵呵，鼓励交流~ 2011-03-09 11:11:22
引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-03-08 15:53:01:
我定了两次引物（浓度为4OD），发现用的挺快的，一个月就用了2管，我想下次再定时增加引物浓度（如8OD,10OD），不知道会有什么影响吗？

我的天，楼主你真是在吃引物呢，呵呵
我们一般只合成2OD，分两管，每管1OD，
每管用的时候稀释到20uM，引物终浓度0.2uM就可以得到比较好的结果了，
如果给范围的话，终浓度是在0.1－1uM之间

[ Last edited by xu_hai on 2011-3-8 at 19:46 ]
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8楼2011-03-08 19:41:43
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xu_hai at 2011-03-08 19:41:43:
我的天，楼主你真是在吃引物呢，呵呵
我们一般只合成2OD，分两管，每管1OD，
每管用的时候稀释到20uM，引物终浓度0.2uM就可以得到比较好的结果了，
如果给范围的话，终浓度是在0.1－1uM之间

[ Last ed ...

是嘛，我是先用TE稀释到100um,然后用的时候稀释到20um的做~~~
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9楼2011-03-08 20:10:08
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xu_hai

铁杆木虫 (职业作家)
★
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引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-03-08 20:10:08:
是嘛，我是先用TE稀释到100um,然后用的时候稀释到20um的做~~~

那只能说明你用这个引物用的很频繁，一个月用几百次，厉害，呵呵，按平均每管20uM引物300ul算，每次取1uL，平均每天要做10次以上，既然用引物，那肯定要PCR了，每次PCR跑2小时，一天实验20小时以上，看来你实验强度很大嘛，
除非你每次取10ul引物，呵呵。。。

[ Last edited by xu_hai on 2011-3-9 at 09:33 ]
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10楼2011-03-09 09:26:13
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