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【求助/交流】引物合成浓度
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[交流]
【求助/交流】引物合成浓度
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我定了两次引物(浓度为4OD),发现用的挺快的,一个月就用了2管,我想下次再定时增加引物浓度(如8OD,10OD),不知道会有什么影响吗?
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1楼
2011-03-08 15:53:01
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wqj1988926
at 2011-03-08 17:22:19:
怎么会呢,你稀释了吗,一般都会加入400微升的te溶解,使用时用一微升就行了
是呀,先用TE稀释到100um的浓度啊,但是按照引物合成单上的说明,没有加那么多量TE的,就加100多微升啊。。。
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5楼
2011-03-08 18:37:47
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Originally posted by
天使托
at 2011-03-08 17:12:38:
我说楼主,你吃引物啊(玩笑)!一般4OD,我们回来一管足矣!只需要把基因扩增出来进行下游工作就可以了!
我也不知道为什么这么快哇,我引物用量2微升(20um浓度)
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6楼
2011-03-08 18:38:43
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Originally posted by
yj-lzx
at 2011-03-08 17:24:45:
楼主你用的是够快的啊~~~我一管都用好久啊
我不知道为什么哇
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7楼
2011-03-08 18:39:15
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Originally posted by
xu_hai
at 2011-03-08 19:41:43:
我的天,楼主你真是在吃引物呢,呵呵
我们一般只合成2OD,分两管,每管1OD,
每管用的时候稀释到20uM,引物终浓度0.2uM就可以得到比较好的结果了,
如果给范围的话,终浓度是在0.1-1uM之间
[
Last ed ...
是嘛,我是先用TE稀释到100um,然后用的时候稀释到20um的做~~~
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9楼
2011-03-08 20:10:08
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Originally posted by
jhu132llh
at 2011-03-09 17:33:37:
大家都在追究为什么用这么多
却没有回答人家的问题嘛
是可以的,你可以向试剂公司要求8OD甚至更多的,
回来按说明书稀释使用就行了
呵呵 ,谢谢~~~~~~~~~~~
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16楼
2011-03-10 09:21:09
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Originally posted by
xu_hai
at 2011-03-09 09:26:13:
那只能说明你用这个引物用的很频繁,一个月用几百次,厉害,呵呵,按平均每管20uM引物300ul算,每次取1uL,平均每天要做10次以上,既然用引物,那肯定要PCR了,每次PCR跑2小时,一天实验20小时以上,看来你实 ...
额,我每次取的是2微升,每管20uM引物也木有那么多的量啊~~~~~~~~~
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17楼
2011-03-10 09:26:17
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