24小时热门版块排行榜    

查看: 2579  |  回复: 20

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wyyun3025 at 2011-03-07 20:09:12:
我正准备做免疫沉淀

那你有好的建议给点吧。
11楼2011-03-07 21:17:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 寒蕤 at 2011-03-07 17:24:34:
10cm皿的细胞不够吗?

我还没有做。但是《分子克隆》中的免疫共沉淀实验要30个长满细胞的10 cm皿。
12楼2011-03-07 22:28:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2011-03-07 22:28:58:
我还没有做。但是《分子克隆》中的免疫共沉淀实验要30个长满细胞的10 cm皿。

再请教一个问题:《分子克隆》上面的NETN中的氯化钠是100mM,怎么下面有说是“NETN,含900mM氯化钠”?这个是什么意思?谢谢!
13楼2011-03-08 15:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
are you sure your target protein expressed at this stage?
If yes, try to use low concentration of wash buffer for wash steps
and also can try to use cross link
if you think their interaction is direct, you also can try to use yeast two hybrid
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
14楼2011-03-08 21:11:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
Originally posted by 寒蕤 at 2011-03-08 15:57:47:
再请教一个问题:《分子克隆》上面的NETN中的氯化钠是100mM,怎么下面有说是“NETN,含900mM氯化钠”?这个是什么意思?谢谢!

不知道
15楼2011-03-08 21:27:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-08 21:11:53:
are you sure your target protein expressed at this stage?
If yes, try to use low concentration of wash buffer for wash steps
and also can try to use cross link
if you think their interaction is  ...

谢谢,现在我用交联剂试试看。
16楼2011-03-09 10:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 寒蕤 at 2011-03-09 10:09:21:
谢谢,现在我用交联剂试试看。

hopefully it will work
good luck
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
17楼2011-03-09 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-09 15:27:16:
hopefully it will work
good luck

Thank you!
18楼2011-03-09 17:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asgate

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
细胞太多了。。。裂解液这么少能裂开了吗?你就用你师兄一样的裂解液,但是细胞不用这么多。
19楼2012-08-23 18:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小核桃小

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 寒蕤 at 2011-03-07 19:41:30
我用的裂解液是150mMNaCl,10mMTris-HCl pH8.0,1%NP40,1mM PMSF.
是不是去垢剂用CHAPS比NP40更好呢?这两个有什么区别?它们的浓度用多大比较合适呢?谢谢!...

有专门做IP的裂解液啊,温和型的,据说如果用WB的裂解液,会破坏蛋白之间的相互作用。
呆呆的呆呆
20楼2013-07-07 10:26:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 寒蕤 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 274求调剂 +4 顾九笙要谦虚 2026-03-24 4/200 2026-03-24 16:28 by barlinike
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 305分求调剂(食品工程) +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 收08调剂生 +3 komorebi69 2026-03-18 3/150 2026-03-24 12:03 by c陈哲
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +12 吃吃吃才有意义 2026-03-19 13/650 2026-03-24 10:06 by NCUT_Yu
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见