24小时热门版块排行榜    

查看: 2582  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助 免疫共沉淀实验 已有8人参与

各位好!小妹最近在做免疫共沉淀实验,但是几轮下来没有得到结果。我用的是10cm的皿,加入500ul-600ul裂解液,protein G beads的量为40ul,一抗为1.5ug。
抗体先和上清裂解液4度孵育过夜,然后又加beads4度孵育4h。最后用裂解液洗三次。做了western后可以检测到目的蛋白,但是没有检测到相互作用蛋白。希望大家给点建议。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangleisdnu

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 寒蕤 at 2011-03-09 10:09:21:
谢谢,现在我用交联剂试试看。

hopefully it will work
good luck
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
17楼2011-03-09 15:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:45:06
但是没有检测到相互作用蛋白

说不定就没有发生相互作用……
3楼2011-03-07 17:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2011-03-07 17:05:38:
可能细胞量不够

10cm皿的细胞不够吗?
4楼2011-03-07 17:24:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-07 17:08:08:
但是没有检测到相互作用蛋白

说不定就没有发生相互作用……

但是之前实验室的师兄通过串联亲和纯化(TAP)的方法吊到了与目的蛋白相互作用的蛋白了,现在导师就是让我要CoIP做出来。但是不知道为什么,CoIP就出不来了?现在希望大家可以指点一下。谢谢了!
5楼2011-03-07 17:28:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0805 316求调剂 +5 大雪深藏 2026-03-18 5/250 2026-03-24 21:27 by 星空星月
[考研] 289求调剂 +8 硕星赴 2026-03-23 8/400 2026-03-24 20:17 by peike
[考研] 274求调剂 +5 顾九笙要谦虚 2026-03-24 5/250 2026-03-24 18:43 by jhhcooi
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 305分求调剂(食品工程) +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
请填处理意见