应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】抗微管药物的体外筛选问题
51/1返回列表
查看: 2271  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

孤岛浪客

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】抗微管药物的体外筛选问题

请教各位前辈，我正在做两个化合物的抗肿瘤药理研究，细胞增殖抑制上做出效果较好，但在细胞周期上没有做出结果，正在寻找其靶点，想在微管方面做一下，看它们有没有在微管方面有作用，目前查到的资料很少，具体归结为两类，一类是通过细胞免疫荧光拍照，一种是体外的模型筛选。

1.对于细胞免疫荧光方面，想求助一下详细的步骤和注意点，并想请高手指点一下对于肿瘤细胞株的选择有没要求，是不是细胞核大一点的更利于拍出比较好的照片。

2.对于体外模型的筛选，想寻求一下具体步骤和要点，查到的资料都是自己提取的微管蛋白，有的是在比色皿中测，有的是用96孔板测，但实验室没有提取的条件，不知道有没有试剂盒，包括纯的微管蛋白和缓冲液等，麻烦大家附上具体实验所需的主要仪器。

谢谢大家能抽空解答，不甚感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-03-02 10:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励~~ 2011-03-02 18:45:09
孤岛浪客(金币+20): 2011-03-03 10:40:42
如果你要确诊确实是凋亡，光有hoechst一个证据是不够的
包括我刚才说的cas活性测定（要测个cas-3）在内
还得做个Annexin V/PI看看
多方面证据才能支撑凋亡

还要做LDH，看细胞都飘起来的时候LDH释放有没有很剧烈地增加，如果增加好多了，可能是凋亡和细胞毒双方面的机制

所以你要做的东西还很多很多
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-03-02 17:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-03-02 15:17:38
1、增殖上有效果？直接的实验证据是什么？
2、为什么想到细胞骨架？观察到细胞的形态和运动能力改变了吗？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-02 11:27:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤岛浪客

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 11:27:15:
1、增殖上有效果？直接的实验证据是什么？
2、为什么想到细胞骨架？观察到细胞的形态和运动能力改变了吗？

MTT和SRB两个细胞筛选上面都有结果，细胞周期和TOP酶抑制也都做了，没有明显结果，所以想到细胞骨架，Hoechst染色观察结果细胞形态在很低剂量的情况下就该改变了，之后想针对微管找靶点的，你有相关的信息吗？可以指点一下吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-02 12:49:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
1949stone(金币+2): 继续鼓励 2011-03-02 15:17:59
1、MTT和SRB都不是增殖的直接证据。最直接的证据是Brd-U
2、Hoechst只是染核型，核型变，比如固缩着色变亮，那是凋亡，不直接反映细胞骨架的问题

因此，你应该去研究凋亡
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-03-02 14:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 12:52 by C6CRn66RYYXS
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 4/200 2026-11-10 10:51 by YHiw1gou1Eda
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-10 09:23 by 1yv6QACPoY1E
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭