可以说细菌电镜制样的每个步骤都很重要,
1.取材:要求部位准确,块小,时间短,低温,器械锋利,减小机械损伤.
2.固定:戊二醛固定时间可以适当延长,一般不要超过一周,期间要更换一次固定液,且要保持低温固定,充分清洗后再进行锇酸固定1-2小时,时间一定不要太长.
3.脱水:锇酸固定后经过充分清洗,进行酒精梯度脱水,一般50%,70%,80%,95%,无水酒精,
4.样品侵透,包埋.一定要保持干燥,侵透彻底.
5.聚合:由室温到高温梯度升温聚合.如35度,45度,60度顺序.
6.超薄切片:切片机性能,片厚度,捞片,载网质量都需要注意.
7.电子染色:过程中一定要避免一切污染.
这样才有可能得到一幅满意的电镜图像. 很不容易,呵呵! |
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