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晴天1882

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】SDS聚丙烯胺凝胶不聚合

凝胶配方是按照书上说的,应该没错,但是凝胶不聚合,这属于基础实验吧!操作应该也没问题,后来发现所用药品是很老的,估计有十几二十年了,尤其是过硫酸铵,它是催化剂,会不会是这个原因导致凝胶不聚合啊?TEMED我是加了足量的了,一般凝胶不聚合都有什么主要原因?
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)



1949stone(金币+1): maybe 2011-02-27 21:01:35
估计跟其中的某种试剂有关,

建议换试剂~
2楼2011-02-27 21:00:23
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翱宇

禁虫 (正式写手)



lstt09nk(金币+1): 鼓励参与 2011-02-27 21:15:41
过硫酸铵,TEMED,都是只有几周的保质期,建议更换试剂!
3楼2011-02-27 21:02:50
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jingquan

铜虫 (正式写手)


★ ★
lstt09nk(金币+2): 欢迎常来生物版 2011-02-27 21:15:58
晴天1882(金币+5): 谢谢,已经聚合了,是TEMED量加的不足 2011-03-02 20:37:09
1.TEMED加入后要多吹吸几次,这样才能混匀。
2.APS配后分装于小PCR管,存于-20冰箱,用时取出融化加入即可。
3.按分子克隆的配方加入混合后约30分钟就可凝固。
4楼2011-02-27 21:07:50
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晴天1882

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵,TEMED,都是只有几周的保质期,建议更换试剂!

试剂我是新配的,我是怕没效果了
5楼2011-02-27 21:24:48
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)


注意要抽氧的,否则氧阻碍聚合
6楼2011-02-27 23:37:03
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laoshu16

银虫 (小有名气)


温度 放37度 10分钟就凝了
7楼2011-02-28 18:40:17
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引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵,TEMED,都是只有几周的保质期,建议更换试剂!

啥时候换头像了
8楼2011-02-28 19:55:02
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引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-02-27 21:00:23:
估计跟其中的某种试剂有关,

建议换试剂~

啥时候换头像了
9楼2011-02-28 19:55:52
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引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵,TEMED,都是只有几周的保质期,建议更换试剂!

引错了
10楼2011-02-28 19:56:11
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)


过硫酸铵现用现配,冰箱放置也不要超出两个星期
TEMED可以多加
37度放置凝的会更快些
11楼2011-02-28 20:06:57
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-28 19:55:02:
啥时候换头像了

哈哈,刚换不久久被你发现了
12楼2011-02-28 20:42:02
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TSRCD

木虫 (正式写手)


我也曾经也遇到过同样的问题,我们把所有的试剂重新配后,问题消失了,而且配好的胶只要十分钟左右就会凝了
13楼2011-03-01 22:38:47
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路人甲007

木虫 (正式写手)


AP TEMED可能不行了  找别的实验室借下试试
14楼2011-03-02 08:30:28
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xingxing342

银虫 (小有名气)


我前一阵遇到过这种问题,后来重新买了丙烯酰胺和过硫酸铵的药品,就解决了,过期药品不能用啊,耽误时间害死人啊!
15楼2011-03-02 09:17:29
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甲天下

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by zhouxj at 2011-02-27 23:37:03:
注意要抽氧的,否则氧阻碍聚合

请问如何抽氧?
16楼2011-03-09 10:41:08
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hkfgwww

银虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很有可能是过硫酸铵的问题,这个问题我们也出现过。
17楼2011-03-09 14:14:03
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dongmings

木虫之王 (文学泰斗)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
十有八九是过硫酸铵的问题,先换这一个试试
18楼2011-03-09 16:15:06
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gppwfh

金虫 (正式写手)


同意3楼
19楼2011-03-09 16:22:11
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秋千细舞

铜虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
过硫酸铵要换,配好之后要避光保存的
20楼2011-03-09 18:31:39
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fujiezi1005

银虫 (小有名气)


多加些AP试试
21楼2011-03-09 21:55:23
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
Aps现用现配,可以试着把灌好的胶放在培养箱里几个小时
22楼2011-03-10 01:16:30
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