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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS聚丙烯胺凝胶不聚合
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晴天1882

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS聚丙烯胺凝胶不聚合

凝胶配方是按照书上说的，应该没错，但是凝胶不聚合，这属于基础实验吧！操作应该也没问题，后来发现所用药品是很老的，估计有十几二十年了，尤其是过硫酸铵，它是催化剂，会不会是这个原因导致凝胶不聚合啊？TEMED我是加了足量的了，一般凝胶不聚合都有什么主要原因？
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1楼 2011-02-27 20:54:07
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
★
1949stone(金币+1): maybe 2011-02-27 21:01:35
估计跟其中的某种试剂有关，

建议换试剂~
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2楼2011-02-27 21:00:23
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翱宇

禁虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1): 鼓励参与 2011-02-27 21:15:41
过硫酸铵，TEMED，都是只有几周的保质期，建议更换试剂！
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3楼2011-02-27 21:02:50
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jingquan

铜虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 欢迎常来生物版 2011-02-27 21:15:58
晴天1882(金币+5): 谢谢，已经聚合了，是TEMED量加的不足 2011-03-02 20:37:09
1.TEMED加入后要多吹吸几次，这样才能混匀。
2.APS配后分装于小PCR管，存于-20冰箱，用时取出融化加入即可。
3.按分子克隆的配方加入混合后约30分钟就可凝固。
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4楼2011-02-27 21:07:50
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晴天1882

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵，TEMED，都是只有几周的保质期，建议更换试剂！

试剂我是新配的，我是怕没效果了
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5楼2011-02-27 21:24:48
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)
注意要抽氧的，否则氧阻碍聚合
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6楼2011-02-27 23:37:03
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laoshu16

银虫 (小有名气)
温度 放37度 10分钟就凝了
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7楼2011-02-28 18:40:17
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵，TEMED，都是只有几周的保质期，建议更换试剂！

啥时候换头像了
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8楼2011-02-28 19:55:02
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-02-27 21:00:23:
估计跟其中的某种试剂有关，

建议换试剂~

啥时候换头像了
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9楼2011-02-28 19:55:52
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by 翱宇 at 2011-02-27 21:02:50:
过硫酸铵，TEMED，都是只有几周的保质期，建议更换试剂！

引错了
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10楼2011-02-28 19:56:11
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)
过硫酸铵现用现配，冰箱放置也不要超出两个星期
TEMED可以多加
37度放置凝的会更快些
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11楼2011-02-28 20:06:57
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-28 19:55:02:
啥时候换头像了

哈哈，刚换不久久被你发现了
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12楼2011-02-28 20:42:02
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TSRCD

木虫 (正式写手)
我也曾经也遇到过同样的问题，我们把所有的试剂重新配后，问题消失了，而且配好的胶只要十分钟左右就会凝了
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13楼2011-03-01 22:38:47
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路人甲007

木虫 (正式写手)
AP TEMED可能不行了  找别的实验室借下试试
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14楼2011-03-02 08:30:28
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xingxing342

银虫 (小有名气)
我前一阵遇到过这种问题，后来重新买了丙烯酰胺和过硫酸铵的药品，就解决了，过期药品不能用啊，耽误时间害死人啊！
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15楼2011-03-02 09:17:29
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甲天下

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zhouxj at 2011-02-27 23:37:03:
注意要抽氧的，否则氧阻碍聚合

请问如何抽氧？
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16楼2011-03-09 10:41:08
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很有可能是过硫酸铵的问题，这个问题我们也出现过。
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17楼2011-03-09 14:14:03
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dongmings

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
十有八九是过硫酸铵的问题，先换这一个试试
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18楼2011-03-09 16:15:06
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gppwfh

金虫 (正式写手)
同意3楼
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19楼2011-03-09 16:22:11
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秋千细舞

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
过硫酸铵要换，配好之后要避光保存的
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20楼2011-03-09 18:31:39
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fujiezi1005

银虫 (小有名气)
多加些AP试试
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21楼2011-03-09 21:55:23
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Aps现用现配,可以试着把灌好的胶放在培养箱里几个小时
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22楼2011-03-10 01:16:30
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